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1. 将小鼠固定好,将尾巴拉直,绷紧,这是成功的第一步。 d( v5 @/ M/ `8 L% J
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小鼠性情较温顺,一般不会咬人,比较轻易抓取固定。通常用右手提起小鼠尾巴将其放在鼠笼盖或其它粗糙表面上,在小鼠向前挣扎爬行时,用左手拇指和食指捏住其双耳及颈部皮肤,将小鼠置于左手掌心、无名指和小指夹其背部皮肤和尾部,即可将小鼠完全固定。在一些非凡的实验中,如进行尾静脉注射时,可使用非凡的固定装置进行固定,如尾静脉注射架或粗的玻璃试管。如要进行手术或心脏采血应先行麻醉再操作,如进行解剖实验则必须先行无痛处死后再进行。
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4 z' I& g$ `+ |6 B; W2 \1 V, v 或者用这个方法:0 _$ b; u1 I7 y0 L: y
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(1)小鼠要固定好,自制一个笼子,前面通气,中间最好有一个挡板,让小鼠不能后退,筒子后面开一个口,尾巴从这里出来,这样固定牢靠;. j; A/ H1 {0 k6 q, E, E
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(2)注射前尾巴用稍热的水浸泡几分钟,有利于注射;
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: ^2 |: j- m" |% V% ` (3)先远后尽,不要一开始就从尾根部,那样失败了不好办;
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: ~5 _6 n$ Y. i" E- D" P0 W (4)进血管后注重保持稳定,针尖很轻易刺穿血管的。至于能否穿进,个人手感如何,全靠自己啦。多练习,一定很快把握的,不难,绝对不难!我练习10余只小鼠就比较熟练了$ C$ A" m# b+ i2 Z x, _
* \6 t/ a0 Y7 p# J g& Z2 D# p& t- K 2. 用酒精棉球擦拭尾巴,使血管扩张;或者用热水或者热毛巾焐热,使静脉扩张;选用适当的针头,越细越好;在尾部较靠近上段的地方注射,这里血管比较大。用酒精或热水擦拭,擦拭的时候,可把尾巴用力扯在桌面上。注射状态为尾巴发白,紧靠白色的尾骨两侧清楚可见两根红色静脉。. P3 J) i7 B! S. W1 R9 ^) V/ Y
% M1 d9 l% z0 s: u+ C' z 3. 用左手的食指,中指,无名指及大拇指将小鼠尾巴固定;手法:握住1ml注射器前面0.1ml处。右手小指搭在拽着鼠尾的左手拇指处按此手形进针;看针尖前面那个斜面有3/4(要害),假如血管充盈则进1/2,进入,停,上挑针头,进针;左右轻摆动,如可动,可注射。原则是:把你第一次打进的手形,完全固定下来,每次都重复。4.注射:注射时左手扯尾,使尾巴紧贴桌面,尾巴与桌边紧贴转弯处为进针部位,一般选择距尾尖1/4或1/3处进针,此处皮肤较薄,血管清楚,进针轻易。进针时针头与桌面平行,针尖稍稍朝下,从中指及无名指与拇指接触处稍上方进针,一旦进入,须将针头稍稍上挑进入,针头沿血管进入,肉眼可关察到针头前进。假如针头在血管中前进,可明显地感觉到针行通畅,毫无阻力。若针头不在血管中,手感针行有阻力,有一种堵的感觉。进针时不要太深,针头入皮肤后马上把针头略往上,平行进针,针扎入时有落空感,推液时无阻力则说明成功了!如针头处出现皮丘则说明在皮下,推出重来。进针处最好在尾巴的1/3-1/2处,甚至可以更下一点。这样一次失败了还可以往上再来,不要马上在最高处打,因为你们要打这么多天。要为以后作预备。用热水、酒精、红外都可以扩张血管。可以视情况而用。总而言之,最重要的是“熟能生巧”。你最好先练习一下或请高手相助。不然到了最后几天,真的很难打的。
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8 j6 b6 }+ j1 e1 T+ x/ A 2. 注射:针进入后,切记手不可发抖,因为血管壁非常薄,轻易扎穿。推药时,要缓推。若进针成功,推药顺畅,无阻力;若推药时感觉有阻力,说明针头不在血管中,须及时拔出,重新进针。一般选用4号或4号半针头。最好用打疫苗的2毫升一次性注射器。尾静脉注射并不难,主要是一种感觉。若用上十只鼠练手,你必会找到感觉。心要静,手要稳,要有耐心。
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8 r' x% k8 g) K& |3 { 5.通过看有无回血来测试针是否在静脉内; ) P* `6 O% V4 S
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6.注射.做到以上步骤,保证注射成功!
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(1)假如做细胞移植时,应该尽量把细胞打散,不然很轻易引起栓塞!
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* C7 x! t. A4 V; ]9 {9 r. W (2)练习:建议你先用蓝墨水练手,因为新手往往看不出打入的是皮下还是静脉其实真的只能熟能生巧一般推荐在尾下1/3处进针,但是我觉得1/2处准确度较好,个人经验针头可以插深入些,防止意外摆动戳破静脉而注入皮下,很多时候你觉得进了血管打的却是皮下,就是因为这个原因。, c* ]6 r/ r" v; g! z& @
' t8 E' ?& E1 ^$ _% | 或者用:经常尾经脉注射胎盘兰,比较轻易,静脉在侧面比较粗的那个,可以做个容器,我们是用一个50ml的离心管前面弄个开口,后面的螺盖弄个洞,把老鼠装进去,比较轻易,把都对准管小鼠自动进去,把尾巴从盖子的洞穿出来,操作极为方便。刮毛,用热水烫一下,血管涨起来就可以,具体的感觉还要自己实践一下把握,不过很容易,有3-4只就可以把握。
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" a/ ~& Z4 e3 ]! [# \ (3)规律:动物越小越好操作,小鼠比大鼠轻易,幼年大鼠比成年大鼠轻易;对于小鼠最好还是尾静脉注射,这样损伤最小;成年大鼠实在不行可以选股静脉注射,相对要轻易一些;最重要的一点,必须多练,进针时的那种感觉必须自己好好体会,熟能生巧,这是常识。
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