谁在做CIk细胞培养

人医

内容最近好虑闷，细胞老是养不好。以前每天可以传代。现在一个星期也不能分瓶？那位大侠有没有碰到过指点一二。试剂有没有问题6 N. ~- i( n0 f

cjsbaicai

是不是你们的因子工作液放久了

yongqingsun

" u8 {- u/ o% v" c1 X7 E8 P/ q" e- h请试验下次方案：INF-r 500U/ml   IL-2  300U/ml   CD3  10ng/ml   IL-1100U GM-CFS 100ng/ml

xiaolong

回复 人医 的帖子! r( E5 a0 q8 W% a
- b% M. u1 u( l( X; `
你是做CIK科研的？血样来源不同，细胞增殖情况也不同，你的环境有没有给予最适条件，试剂和以前的有没有变化，是不是有过期的，你自己慢慢琢磨排查吧，祝楼主好运

xu_shufen

是否有支原体、衣原体污染，因为支原体、衣原体污染镜下是看不见的，另外细胞密度是否合适，太稀长的很慢。

daifenghao

day0 +INFr 1000u/ml，day1 +CD3 25ng/ml+IL-2 500u/ml。day3+等量培养液+5%同血型血清+CD3+IL-2.以此类推

realff

你的血液来源是否检查过，可能分离出的单个核细胞太少；试剂是否过期失效，特别是CD3要注意；是否添加足够血清，有时加一点和不加区别很大的。

xiaostou

楼主提问题应该详细描述 一两句话 再高的专家也找不出原因.

yizuiqiannianga

这个问题要看你以前是不是养的挺好，如果以前养的好现在不好的话，一个是考虑污染，支原体和衣原体，另一个是考虑试剂是否过期
( x0 v, M, n" e; O如果之前养的就不怎么好就是你培养方式还有因子加入量的问题：可以按六楼所讲来操作，另外如果IL-2用的是国产医用的话，可以加到1000U/ml甚至更高一些也没问题，另外可以考虑用一下添加CD282 g' H6 {* {/ P" E* f5 p

luyue6453

我以前也出现过这种情况，后来发现尽管用同样的方法，血源不同差别很大，你要找个健康的，年轻的人采血会发现生长很快，如果是病人身体条件差的话他的细胞长的就慢，你换个人再试试