脐带MSC真是mSC吗？还是成纤维细胞？

henryjia

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0 A2 s5 ]) i4 P" a  P  Y$ ^能请教你是用的什么培养基养脐带MSC吗？分化实验培养基是那种？分化时间有多长？
1 r, y2 |; T; n/ ~  v8 o0 L+ y1 g+ F: b% t
是不是不能用骨髓MSC 的分化方法？

henryjia

回复 coffee.cat105 的帖子9 M/ `! |$ k0 }: g

* _: `7 p, M; O) j我至少试了三个样本，成骨成脂最长达3周。

henryjia

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% q, y8 f5 L) b2 T% I
4 B& c" W9 l4 n. [0 ]+ h) h+ U我对文献持怀疑态度，不知道各位同仁有没有自己试验成功的。7 B6 ^/ Y* L7 w: D: v8 l

1 H% }  l  m8 f9 E' O4 a很想知道，是不是真的可行。唉，进展缓慢，急呀！

老姜

回复 henryjia 的帖子$ d4 M  H3 e5 M
0 x# R: Y3 Q( l- E
分化培养液配方是文献常用的就行。培养液为ＬＧ－ＤＭＥＭ，血清是Ｇｉｂｃｏ澳洲产的。

老姜

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& Z) l+ L; Y/ x" F- F; }  ]9 f' @
脂肪诱导技巧：使用质量差的血清诱导脂肪分化相对快点，诱导约２０－３５天；
) U. @: P8 Q6 i! i成骨诱导技巧：避光！试剂，换液均避光，少在显微镜下观察，多个样本时只观察一个样本，诱导约２０天以上。

henryjia

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# d+ ^2 n' w  Y! t- O+ L* N; H1 c$ w' \! H& c$ I! y9 S9 U
您有没有用R&D现成的那种分化添加剂？' y. x8 q  ?, _$ w

7 Y/ ~# m% H. t6 z% X, D* r% o9 U1 I) L  h我做的可以观察到酯化液滴，但是很少。成骨很弱。
) m# `% P" a" O' @, `& b, y& z
- D8 X/ [0 a) u细胞形态非常好，流式结果也很好。所以很郁闷。
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是否可以请教您的分化配方吗？
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0 X* ]- e0 }7 t请您指教。多谢
8 k  f0 v' M4 _9 `5 I# x' R, t

weibin2002

干细胞会因为所处的阶段不同，诱导的条件和时间也有不同吧。骨髓的可以诱导成功，说明不是试剂的问题；可能诱导剂的浓度和时间等条件还需完善吧

老姜

回复 henryjia 的帖子. b+ c/ B& k/ T  [# H

3 [2 a9 k) ^% n# V4 B成骨诱导：５０μＭ的Ｌ－抗坏血酸；１０ｎＭ的β－磷酸甘油钠；１０ｎＭ的地塞米松；１０％ＦＢＳ；２ｍＭ的Ｌ－ｇｌｕｔａｍｉｎｅ；１００ｕ／ｍＬ的Ｐ／Ｓ；补足ＬＧ－ＤＭＥＭ（避光，临用前加地塞米松）．
. ?* |. V) ^. W0 s, W/ f; r# V成脂诱导：完全诱导液：０.５ｍＭ的ＩＢＭＸ；１００ｍＭ的吲哚美辛；１μＭ的地塞米松；１０μｇ／ｍＬ的胰岛素；１０％ＦＢＳ；２ｍＭ的Ｌ－ｇｌｕｔａｍｉｎｅ；１００ｕ／ｍＬ的Ｐ／Ｓ；维持液：１０μｇ／ｍＬ的胰岛素、每三天换一次液，第一次用完全诱导液，第二次用维持液循环三个周期，一直用维持液换液，直至镜下见脂质滴形成，为使脂质滴多点，可多养几天。

henryjia

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- c" c! b. J$ V) X/ ?- F$ w
多谢指教。