脐带MSC真是mSC吗？还是成纤维细胞？

henryjia

回复 jack1381818 的帖子: X& O: b) ^' r7 B

5 L6 L1 Y& X+ e$ ]9 \8 f能请教你是用的什么培养基养脐带MSC吗？分化实验培养基是那种？分化时间有多长？
1 q0 \) F2 U8 j5 x# K# E
% ]3 a9 N: {+ `3 ^+ [) V3 G是不是不能用骨髓MSC 的分化方法？

henryjia

回复 coffee.cat105 的帖子+ s9 J! }+ \' g6 d" [$ R9 i' H. y

+ z0 [" Y, @- x我至少试了三个样本，成骨成脂最长达3周。

henryjia

回复 老姜 的帖子1 q5 i0 a4 I6 |( l

# H; ~2 F% P' ^7 B* U" J我对文献持怀疑态度，不知道各位同仁有没有自己试验成功的。* u5 Y2 W3 e: ^7 G, z1 S4 L
$ o) Z# ~) v& B" B7 W1 B! ^
很想知道，是不是真的可行。唉，进展缓慢，急呀！

老姜

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- v7 x' r: j# P7 J% [6 f0 k$ |( I* i, X. L! F
分化培养液配方是文献常用的就行。培养液为ＬＧ－ＤＭＥＭ，血清是Ｇｉｂｃｏ澳洲产的。

老姜

回复 henryjia 的帖子2 c8 S$ n1 s& Y5 c6 D

1 n) F- G- Z3 [& D* o脂肪诱导技巧：使用质量差的血清诱导脂肪分化相对快点，诱导约２０－３５天；
. D1 ?/ x8 r' P$ t+ _成骨诱导技巧：避光！试剂，换液均避光，少在显微镜下观察，多个样本时只观察一个样本，诱导约２０天以上。

henryjia

$ h7 l% i- Q0 L9 t
( X# C8 P* N1 V1 I" u3 F回复 老姜 的帖子
4 ]. u( I! y  t) {9 L0 L  ]1 ^5 a% l: r6 C2 V
您有没有用R&D现成的那种分化添加剂？7 S5 K3 }$ t; Q: y; I/ z
7 r, u" F. G3 V
我做的可以观察到酯化液滴，但是很少。成骨很弱。7 ]& L$ D  n( h2 \7 [
" u- O6 y5 [5 {8 H: C/ ]1 {
细胞形态非常好，流式结果也很好。所以很郁闷。1 A6 o: ?) u/ l9 r6 Q& `

! x% C' N; C$ B4 ]! ?是否可以请教您的分化配方吗？ ' l2 C/ |8 c) n* O

0 ^& V+ f8 [# I4 j2 q6 s请您指教。多谢4 _, e$ f9 o$ h" C

weibin2002

干细胞会因为所处的阶段不同，诱导的条件和时间也有不同吧。骨髓的可以诱导成功，说明不是试剂的问题；可能诱导剂的浓度和时间等条件还需完善吧

老姜

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9 [6 D! d) m& j7 _, G- ]5 h# j( k9 S  I9 g3 m# Y7 u: g+ b" D
成骨诱导：５０μＭ的Ｌ－抗坏血酸；１０ｎＭ的β－磷酸甘油钠；１０ｎＭ的地塞米松；１０％ＦＢＳ；２ｍＭ的Ｌ－ｇｌｕｔａｍｉｎｅ；１００ｕ／ｍＬ的Ｐ／Ｓ；补足ＬＧ－ＤＭＥＭ（避光，临用前加地塞米松）．
9 F$ M! B1 i: e; w+ L' s1 x0 b成脂诱导：完全诱导液：０.５ｍＭ的ＩＢＭＸ；１００ｍＭ的吲哚美辛；１μＭ的地塞米松；１０μｇ／ｍＬ的胰岛素；１０％ＦＢＳ；２ｍＭ的Ｌ－ｇｌｕｔａｍｉｎｅ；１００ｕ／ｍＬ的Ｐ／Ｓ；维持液：１０μｇ／ｍＬ的胰岛素、每三天换一次液，第一次用完全诱导液，第二次用维持液循环三个周期，一直用维持液换液，直至镜下见脂质滴形成，为使脂质滴多点，可多养几天。

henryjia

回复 老姜 的帖子+ w  m  s; t  |7 ?) u
/ F0 Q: L' m+ r$ R
多谢指教。