脐带MSC真是mSC吗？还是成纤维细胞？

henryjia

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能请教你是用的什么培养基养脐带MSC吗？分化实验培养基是那种？分化时间有多长？
- P8 O3 ^/ Y; V
2 ^' Z" t( k/ I4 G; ]  Y) x/ z4 S$ D/ d是不是不能用骨髓MSC 的分化方法？

henryjia

回复 coffee.cat105 的帖子: i1 J4 X3 H" }8 `" R- @
# L! r% Y. J: s' `  R
我至少试了三个样本，成骨成脂最长达3周。

henryjia

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: _5 s5 E+ t' e4 j- v. J* B" }8 Z$ e3 x
我对文献持怀疑态度，不知道各位同仁有没有自己试验成功的。
. I; U, n) M3 a5 \( A* l9 O$ n  v
, z8 X5 z: [1 M: d- L0 o' p很想知道，是不是真的可行。唉，进展缓慢，急呀！

老姜

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$ v- Y+ h) _. e( h
+ K' r4 o2 H/ l1 D8 |. o3 Y分化培养液配方是文献常用的就行。培养液为ＬＧ－ＤＭＥＭ，血清是Ｇｉｂｃｏ澳洲产的。

老姜

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$ \3 _4 o& f, C7 ], G+ }
$ [' f5 q0 o5 J! c, e# S1 S脂肪诱导技巧：使用质量差的血清诱导脂肪分化相对快点，诱导约２０－３５天；
" @; F+ l$ ?. X/ t成骨诱导技巧：避光！试剂，换液均避光，少在显微镜下观察，多个样本时只观察一个样本，诱导约２０天以上。

henryjia

: y- E7 z; m) [# `# d: k/ n
) L8 c  x/ b, A. N8 }% N: ~# U  ?回复 老姜 的帖子
4 S2 U3 {% U+ x0 A
$ j+ Z8 K$ s" E* H1 y! J9 j4 }您有没有用R&D现成的那种分化添加剂？' M. M; h& f* A2 F6 Y
7 g2 h. I7 P, Z& u# N: l
我做的可以观察到酯化液滴，但是很少。成骨很弱。! M9 J! X! x6 {8 l
2 u8 E( D8 |$ A+ t) i6 P
细胞形态非常好，流式结果也很好。所以很郁闷。
: L7 @$ I% M4 o( K2 k* a
2 `1 e( y7 K& `& {( f$ Y是否可以请教您的分化配方吗？ 8 H& e9 j1 g* ?7 x, X: W8 \
4 M# G* c' P* C: B" \6 V
请您指教。多谢: r9 C! T; U; f* Z& l3 j

weibin2002

干细胞会因为所处的阶段不同，诱导的条件和时间也有不同吧。骨髓的可以诱导成功，说明不是试剂的问题；可能诱导剂的浓度和时间等条件还需完善吧

老姜

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7 M+ ~5 i; A' L% z* x( B$ {" I9 t/ y% M- V! z* V0 G) b
成骨诱导：５０μＭ的Ｌ－抗坏血酸；１０ｎＭ的β－磷酸甘油钠；１０ｎＭ的地塞米松；１０％ＦＢＳ；２ｍＭ的Ｌ－ｇｌｕｔａｍｉｎｅ；１００ｕ／ｍＬ的Ｐ／Ｓ；补足ＬＧ－ＤＭＥＭ（避光，临用前加地塞米松）．
. o: j+ S/ P4 m! H1 \% K成脂诱导：完全诱导液：０.５ｍＭ的ＩＢＭＸ；１００ｍＭ的吲哚美辛；１μＭ的地塞米松；１０μｇ／ｍＬ的胰岛素；１０％ＦＢＳ；２ｍＭ的Ｌ－ｇｌｕｔａｍｉｎｅ；１００ｕ／ｍＬ的Ｐ／Ｓ；维持液：１０μｇ／ｍＬ的胰岛素、每三天换一次液，第一次用完全诱导液，第二次用维持液循环三个周期，一直用维持液换液，直至镜下见脂质滴形成，为使脂质滴多点，可多养几天。

henryjia

回复 老姜 的帖子! i; T* e0 T% q9 c

6 w/ s4 m0 ]7 ~7 [9 m多谢指教。