请大家说说你们都是用什么公司的产品来浓缩慢病毒的

ciweiyuan

想提高逆转录病毒和慢病毒的滴度，不知道有什么好方法，麻烦告知生产厂家，最好价格低一些的

axh

一般的浓缩可以用Millipore公司的Amicon Ultra-15 离心超滤管，货号UFC910096。离心浓缩最好在低温（4度左右）下操作，这样才能最小程度降低病毒滴度的损失。; w- p! \! i; r& j: q9 o/ A
另外可以使用超速离心法，但得实验室拥有超速离心机，一般离心力在7-10万个g，离心时间90至120min。

ciweiyuan

回复 axh 的帖子. \2 Z% ~8 s2 }2 J. P5 R+ Z
: L  J+ _+ O9 w
非常感谢，那么就是把病毒原液加到15ml超滤管中离心后，病毒颗粒都在膜上了吗？然后用什么来洗脱呢

ciweiyuan

Millipore公司的Amicon Ultra-15 离心超滤管和另外一个产品Fast-Trap Lentivirus Purification and Concentration Kit相比有什么区别呢

axh

回复 ciweiyuan 的帖子3 b8 o6 N* l( b" F+ m. S0 x0 I

- f, v! ^; m/ J3 R病毒不是在膜上，而是被截留在膜的上方，离心超滤后，剩下的病毒浓缩液体积最少有200ul，病毒就在这200ul液体里面，当然，膜上肯定会吸附一些病毒颗粒，你可以先用200ul枪头（当心不要把膜给戳坏了）将病毒浓缩液吸走后，用适量的培养基润洗一下膜表面。

frankieisme

其实自己配聚乙二醇PEG来浓缩效果跟试剂盒差不多,性价比就很高了.取上清，向上清液中缓慢加入NaCI和PEG-6000至终浓度0. 5mo1/L和8%，搅拌均匀， 4℃冰箱过夜。10000r/min离心30min，弃上清，用0.05mol/L,pH7.6Tris-HC1缓冲液3倍量稀释沉淀，若要继续提取病毒，可作蔗糖梯度离心。

ciweiyuan

回复 frankieisme 的帖子! G; l" P% j1 K8 O2 H3 H& u9 K5 v9 q

4 V$ w: q- }/ f* p( c5 a. B5 k% k谢谢 frankieisme 的回答，用0.05mol/L,pH7.6Tris-HC1缓冲液3倍量稀释沉淀，稀释就是溶解沉淀的意思吗？" g% d7 t, q& }3 B0 z# Q- n- L9 w
若要继续提取病毒，可作蔗糖梯度离心。这句话不太理解，蔗糖梯度离心是用来干什么的？