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楼主: mhqh
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[请教] 抽质粒的时候怎么去除内毒素?   [复制链接]

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发表于 2014-4-15 08:43 |只看该作者
天根的不错,我们都是用天根抽提质粒,然后进行慢病毒包装。
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发表于 2014-4-16 09:48 |只看该作者
细菌内毒素概念是1890年的时候提出,1933年最先由小鼠伤寒杆菌提取出来,进行化学免疫方面的研究,到1940年的时候,摩根使用志贺氏菌阐明了细菌内毒素是由多糖、脂质及蛋白质三部分组成的复合体。1950年以后随着科学的进一步发展,其化学结构组成和各种生物活性间的关系也更加明确。
; m+ y5 i! o. R0 Z% L) A$ ?0 S/ B细菌毒素分为外毒素(exotoxin)和内毒素(endotoxin);外毒素是一种毒性蛋白质,是分泌到菌体外的毒性物质,主要由革兰氏阳性菌等;内毒素是革兰氏阴性菌的细胞壁外壁层上的特有结构,在细菌生活状态时不释放,待死亡自溶或粘附在其它细胞时才表现出其毒性,其主要成分是脂多糖中的类脂A成分。
5 P: b- X% A, e0 M# B去除内毒素的方法有超滤膜和荷电微孔滤膜法、石棉及活性炭吸附法、化学降解法、离子交换色谱法、亲和色谱法等。
5 ^# Q5 D  K4 m- }如果转染细胞,必须要用去内毒素的试剂盒抽提,否则会对细胞有毒性,可以用sigma的去内毒素小提试剂盒,我们实验室比较常用。
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