抽质粒的时候怎么去除内毒素？

cronos0910

you can try to do cesium chloride gradient mega-prep DNA plasmid purification. you can get the highest quality than any other protocols.

heming

买国产的， 要过也可以  

heming

效果  

chenhuachen

小弟现在做p53对转化细胞代谢的影响，急求TET四环素诱导的wt-p53质粒，对接下来的实验非常重要，跪求论坛里的园友谁有这个质粒，可否赠小弟一点，不胜感激！9 k3 b& m. z  ^6 [
人的或者大鼠的野生型p53都可以。

yiyi8909

想问下大提质粒不去内毒素转染影响有多大，不用试剂盒怎么去除内毒素？

石山巨石

! Z0 l9 r. A9 e4 n3 j  `* P6 k4 e" x+ Z% f. L, u
analysis it. you can do it.
$ A2 O' Y: k8 h& _5 f" X2 [; R
' X- y% W' ]$ i& v& o

石山巨石

回复 yiyi8909 的帖子% F! `" V7 C* C# f2 P- Q
: n0 t% A# z' _7 `
要看下游做什么 如果是要做transfection 给小鼠 或者人类细胞 内毒会直接KO掉细胞 所以需要低内毒

yiyi8909

回复 石山巨石 的帖子2 K5 x# d3 S# Y/ f9 B2 Z$ j
5 [, p, ~* {! b% H" l: o
谁要转染细胞，这个有什么好的办法去除吗？实验室只有小提的试剂盒

石山巨石

回复 yiyi8909 的帖子, c5 \" O+ ^  h1 B

  R0 d/ \8 x+ V4 d详情见另外一个帖子 % j1 C& h' l6 Y+ j
不过 还有一点 选vector 在不影响 酶切 PCR引物什么后续的步骤之下 尽量选效率高的" R* V/ q& H: H0 L: v# g, Z5 q6 j
这样下来 eu/mg 由于东西多 内毒素 平均下来就会低浓度
+ r8 ]- K9 s8 b1 n/ j4 Q  X6 |7 W5 O1 }, ~8 D$ t8 Y  ~  q
如果试剂盒 原本设计的就不是endo free  那他试剂可能就会是污染源 所以 先测试剂可用不可用再说

碧螺春的秋天

天根的去内毒素试剂盒不错，听好用的