ADSC长势缓慢，什么原因？

chengge21

前几天提取的大鼠的ADSC，原代细胞数目还是可以的，长得挺快，两天就长满了，然后一传三，细胞长势就慢了，都传代四天了，还是没有长满，跟刚传代时候差不多，血清用的是120块200mL的那种，10%FBS低糖DMEM培养。请问是什么原因，各位养ADSC用的是什么血清？

匡大鹏

我的也是，我基本上原代和第一代第二代长得还可以，可是传到第三代就不行了，长得很慢很慢。

avbn

回复 chengge21 的帖子, j; W9 Y5 h  b  P! S$ E: N
$ {; x! b2 ^3 r' x5 {7 Y% ~
可能是消化时间长了，或者接种密度过低。也可能与脂肪来源鼠的状态、年龄有关系。鼠源ADSC较人源ADSC更易分化，可添加一些细胞因子，维持细胞干性。

zfgxb

可能是血清质量不好，还有，培养基用高糖的长得快

chengge21

回复 avbn 的帖子! F  j  J1 }8 B. K  d: j9 z
8 |+ x- E4 d& L4 U. B9 H! U
请问你添加什么因子呢，我血清换了，SD大鼠用的是4周的，酶用的是0.1%，加入与脂肪体积相同，消化时间为50min。原代长了一周，长到80%多了，1传3，P1代还是挺好的，P2代长得形态也还好，但是细胞传代到第三代还是出现细胞扁平，多边形的状态，不是长梭形的细胞，请问是什么原因呢？球指导，多谢！

avbn

回复 chengge21 的帖子2 x4 k; B4 H# o3 d) a4 P
, x" F$ L9 Z/ P& l! R& \+ d
我觉得消化时间长了，20到30分钟就可以了

chengge21

回复 avbn 的帖子8 h2 v. G; ^, ^* K4 [5 p% ], _

( k9 @: s, q) z- [好的，我下次提取试一下，谢谢！

daiying5200000

基本上是细胞状态不行了，老化了，ADSC传几代就不行了。报道的最长的也就20代，但人家国外的实验室比我们牛，建议用好的血清与细胞因子吧

一箭双雕

: F1 U; S, z* K0 F! O% T5 y2 d0 t. J& M' R2 {
血清120块200ml是新生牛血清或小牛血清吧？建议用胎牛血清，最好是进口的胎牛血清，BD，Biointerational，Hyclone等都还可以，就是贵很多，大概3000-4000块500ml。。。

wf78365421

加细胞因子