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楼主: 永远的伊凡
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细胞每离心一次会损失百分之多少的细胞   [复制链接]

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11楼
发表于 2013-6-3 14:44 |只看该作者
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回复 sunny.yc 的帖子
7 G9 I3 p; ?0 ~, O5 i! V8 ^1 O# O
% m! I9 r! q* `; P, R* R' @1 s好方法,可以试一下

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金话筒 优秀会员

12楼
发表于 2013-6-3 14:49 |只看该作者
回复 永远的伊凡 的帖子: ^: m/ n" I$ H4 i. M+ ~: \

' I1 q# `, q0 h; a) Q/ K7 \) q  [不同的细胞,不同的转速和时间,甚至是不同的离心机和离心管都是不一样的,所以……
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专家 优秀会员 金话筒

13楼
发表于 2013-7-18 15:47 |只看该作者
CIK回收, 洗涤三次,丢失20%。
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14楼
发表于 2013-7-19 14:21 |只看该作者
回复 sunny.yc 的帖子+ ]& O# U  s( n; k: o

; W& a- w' U* N上清液中一般是不会有细胞的,我做过几次显微镜观察,没发现有细胞
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15楼
发表于 2013-7-19 14:51 |只看该作者
最近也遇到了这个问题:6 a- s6 L" ~' L7 n- B% Q
我来描述一下具体情况--细胞消化后离心1800rpm,5min,拿出来发现有沉淀,但是在上清液中有似龙卷风一样的没有被离心下来。(这类东西是因为细胞培养的MEF之间的某些东西)我的做法是小心的弃掉部分上清,再用枪轻轻的打后,重复离心。这次离心后沉淀便稳稳的呆在离心管底下了。! F. H& ]4 _/ N' y  ]
我也担心是否离心次数增加令细胞数量减少,毕竟我的细胞本来就不多(还在建系中),传代后第二天观察,细胞状态良好的,目测细胞数量还不少。  e. f4 R- ~  r" X) A
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16楼
发表于 2013-7-19 16:59 |只看该作者
这个估计没有人做过吧,离心肯定是有损失的,转速低了在上清液中细胞的损失多,转速大了,细胞收到的压力大,又会损伤细胞。不过一般离心细胞选择的转速都在200g到300g时间4到10min不等,具体按照细胞不同而不同,一般300g左右离心5min对绝大多数细胞都适用。在这个转速和时间上,一般细胞损失都很小,也不会对细胞造成损伤。
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