求助我的ES怎么了

一一

小鼠来源，分化较多，克隆体较小，怎么办？上图是P17，下图是P25

watchen198891

怎么看起来像是克隆已经散了？我最近在学习养ips，有一次是出现了这种情况，那个就是ips克隆已经散了，我那个是因为饲养层太稀了造成的。

frankieisme

Feeder太密了的原因.
$ @$ g2 l% k  W+ t你用MEF做feeder?是自己分离的MEF还是买的?丝裂霉素C处理得够不够(1ug/mL处理3小时)?

一一

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0 A7 Y+ [) n9 J2 R; qγ射线照射的，不过是别人做的拿过来的，冻存密度大约2x106 cells，接种1个6孔板

zpzp0312

饲养层没问题，主要是干细胞质量不理想。建议换些新的做。否则很难有好的结果

elvacxx

饲养层看起来状况不佳，建议换3代以内的饲养层，如果换了还有问题，那就是ES的问题，接种的时候不要太稀。

qiushuiwuhen

建议可以再解点EScell，饲养层我是按照MitC 10ug/ml,(2Hour,sigma)处理的，貌似还比较稳定，或者你用钴60照射一批冻起来使用都是可以的，饲养层真的很重要，对于理想的ES的状态来讲，仅供参考。

懵懂干细胞

饲养层看起来太老了，密度铺的差不多，不能再高了！可以考虑重新养新的ES细胞，也可以考虑慢慢驯化，也可以考虑挑取好的克隆养养

bj123

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4 N' S# a: p  ]! Y; d+ q9 y1 w
2 ^, o0 w/ o* n. _1.饲养层有些密。2.消化传代时，消化不完全，你现在的克隆大小太不均一。3.有些ips已经分化，这可能跟培养基有关。

sylar.wy

换成KSR培养基试试吧。