外周血离血清

easternliu

两个问题向大家请教一下) P! `( ?7 Z: Z) B2 D
第一个问题，大家从外周血离血清一般用多少G，分离的血清应该达到什么要求呢？因为不同的人的细胞重量不一样，所以2000r情况下，有些人能分离出淡黄色血清，有些人里面却会掺杂很多的细胞（加自体血清的有很多体壁细胞），血清也显得很浑浊。遇到这样的情况大家是咋解决滴7 `% `$ \) ]4 Z  \% E/ B# ^
第二个问题，血清时间放超过一周后就开始有白色沉淀，在做细胞培养的时候，是直接混匀血清，还是需要去掉沉淀。

chslyx

我现在用3000r离心出来的都比较好，基本都是淡黄色的呢，做细胞培养的时候，是要去掉沉淀的

easternliu

回复 chslyx 的帖子) a% V* U+ u, z& e' F

) w/ i- r( u* R( a& Y3 n: `  `谢谢，你是用的啥离心机哦，3000r对应的大概是多少G哦

chslyx

回复 easternliu 的帖子
' M! O% e) _5 Y1 `- d0 D
  a- a5 l1 }- _. X, R应该是1750G的离心力

stang198651

回复 easternliu 的帖子2 e) A' k9 q+ c  o6 Y
/ Y1 ]& a1 ]- P5 Y6 e3 ]- \* X
      如果你的血液是加了抗凝剂的，那么离心获取的不是血清，而是血浆了。血清，指血液凝固后，在血浆中除去纤维蛋白分离出的淡黄色透明液体或指纤维蛋白已被除去的血浆。血浆是离开血管的全血经抗凝处理后，通过离心沉淀，所获得的不含细胞成分的液体，其中含有纤维蛋白原（纤维蛋白原能转换成纤维蛋白，具有凝血作用），若向血浆中加入钙离子，血浆会发生再凝固，因此血浆中不含游离的钙离子。
* K8 Q" g1 u; h( \$ g0 Y      血浆如果不经过处理，去除纤维蛋白原，那么在加入到培养基之后会发生凝固，培养基会变成凝胶状（本人遇到过），因为培养基里有钙离子。真正的血清放置久了，有了沉淀，是需要去除沉淀的。血浆去除纤维蛋白原，我们原来采用的是冷冻之后放置在室温解冻，纤维蛋白原就会凝固，然后离心，用的抗凝剂是肝素钠。抗凝剂如果是用枸橼酸钠，那么血浆中的枸橼酸钠一般是超标的，加入到培养基之后，还会结合培养基之中的钙离子，造成培养基之中钙离子浓度减少，进而影响细胞生长。

song0610

学习了，谢谢