请教CIK培养过程中出现的絮状物问题！！！

lyj-0017

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- I, f- r3 R+ z2 u
为什么？那是什么原因引起的呢？

yizuiqiannianga

我感觉应该是死细胞造成的，我们也遇到过这种问题，脐血的出现过两次，估计是可能抗凝剂造成的细胞伤害，一般都用的枸橼酸钠，另外就是病人出现过几次，可能是因为病人细胞本身质量就不好，养着养着就死了，成絮状之后细胞就根本不长了，还有就是我曾经把一瓶细胞就那么放着一直放到细胞全死了，就出现那种絮状物，一样一样的，哈哈，所以我觉得是细胞死亡原因。之前救过来一次，就是离心，先低速把絮状物去除，然后又离心把剩余的细胞离下来，继续培养。我觉得和血清没什么关系，因为我们一直就没用过血清

lyj-0017

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我们现在认为更多的是跟病人自身状况有关，少部分跟技术员的经验有关。

long3390hai

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' x! D1 S' \! l3 N- m7 Q# `6 T
$ E  G% ^) `" s  B" I你没在显微镜下观察一下，看看是否染菌，细胞形态如何

牵着蜗牛去散步

培养的过程中等到10天左右，絮状会逐渐的减少，甚至消失，不是染菌。

lyj-0017

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0 W- R9 G; K, b& D4 @
在培养的过程中不可能不动细胞吧？如果不动细胞，过几天有可能絮状物自动散开，但是如果每隔2-3天加液或者换液，絮状物就不容易散开，这也是个问题

牵着蜗牛去散步

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在培养的过程可以动细胞培养袋，需要加液的时候就加液，需要观察的时候就观察，如果你加的是血浆，很有可能是血浆中的纤维蛋白原，与培养液中的ca离子相互结合，形成的絮状物。

李雪莲

可能是细胞太多就聚团了，轻轻拍打细胞袋。但很可能是细胞状态不好，成絮状了。

lyj-0017

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* q9 J; {5 f7 g) p& t0 O. Y8 l
( f9 g* o( t: ~) }  \7 p1 R1 D你说的很有道理，那也就只能把分离出来的单个核细胞多洗几遍，尽量去除血浆中的蛋白原类物质了。还有别的可能的原因吗？

lyj-0017

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; M8 F8 o! }' R) f/ a- e细胞状态不好可能是什么原因呢？