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楼主: lyj-0017
go

请教CIK培养过程中出现的絮状物问题!!!   [复制链接]

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51楼
发表于 2013-6-17 16:02 |只看该作者
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回复 daifenghao 的帖子$ X+ o+ a' v3 o8 l: \

/ C7 Y8 l' I7 E" T+ E6 V6 v) a: E同问同问

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52楼
发表于 2013-6-18 09:49 |只看该作者
回复 daifenghao 的帖子
, p' _9 M+ R) v! j; k4 ~* G5 D$ g* L; y3 s) [' l
你们的血浆经过灭活处理了吗
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53楼
发表于 2013-6-19 08:20 |只看该作者
回复 sunny.yc 的帖子! c1 p! m) e( C; S1 {
1 l2 c( p$ C# F
实际上,在贴壁过程中就已经出现絮状物了,此时是没有添加细胞因子的。但是,有的细胞确实是在培养后出现絮状物的,可能还是不同人对相同细胞因子的耐受程度不一样吧,还需要多积累经验啊,多谢~
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54楼
发表于 2013-6-19 08:23 |只看该作者
回复 xu_shufen 的帖子
( K5 {0 |7 ?! Y& V; @' _
: K$ Z9 `) |5 t嗯,我也认为是纤维蛋白类物质引起的,也可能是细胞量过大的原因,血小板的可能不大,因为分离MNC时都是先把白膜层上方大部分液体先吸掉的,血小板剩余量应该不多
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发表于 2013-6-19 08:25 |只看该作者
回复 daifenghao 的帖子( R+ Y5 U2 h5 E  @

( l7 ^& s; G6 M  e添加进去的应该用血清吧?血浆里面本身就含有大量纤维蛋白,加入血浆后出现絮状物应该在情理之中才对
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发表于 2013-6-19 08:31 |只看该作者
回复 1179240331 的帖子. K) Q5 v/ B, H4 c: \
# S) n* K- \; W7 l( P" r' k, P, N
我们现在也在注意血浆物质残留的问题了,分离MNC时也已经严格清洗了,观察一下看看吧。
) D& V9 b$ C1 s- \) ?4 F采血要是混合不均匀的话,凝血也会使得分离的MNC量减少吧。
" t# J. `! T5 W你的意思他们分离出MNC后进行培养时出现细胞团块吗?
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57楼
发表于 2013-6-19 09:09 |只看该作者
回复 lyj-0017 的帖子
" N, L6 h$ b; e/ D  `* M( D; B+ ~
0 }. A4 N: A2 M, I- J# F如果贴壁的时候有絮状物,是不是血浆的问题,你们用的血浆经过灭活处理过的吗?
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58楼
发表于 2013-6-19 11:10 |只看该作者
回复 sunny.yc 的帖子
; v4 }  ^) {* I$ O
* S3 _4 K, T* k- V/ \0 B我们贴壁的时候只加培养基,没有同时添加血浆(加血浆还是血清?)。
& h8 b" C! _: h, X如果加点白蛋白会不会好点呢?

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59楼
发表于 2013-6-22 12:33 |只看该作者
回复 chenguangyu 的帖子
% t6 U! y/ ^8 \- p: ^4 ^9 T% q. _, b- }) g: C
最近细胞生长的状态如你所说,袋内白膜确实是逐渐自动散开了,并且细胞长势还不错。但是有时候,加液后,原本长得不错的细胞会聚团,像是细胞死掉了聚团?这是什么原因呢?
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60楼
发表于 2013-6-22 12:35 |只看该作者
回复 daifenghao 的帖子; K2 A- T$ C! f# _! A' X" G
" `' C9 k: f( ?# s* x* E# L3 N
我现在发现,细胞铺袋后不要摇晃袋,让细胞自己调整,过几天白色丝膜就会自动消失,你们可以观察一下试试
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