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楼主: lyj-0017
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请教CIK培养过程中出现的絮状物问题!!!   [复制链接]

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11楼
发表于 2013-6-14 13:42 |只看该作者
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回复 呼吸 的帖子$ q. h4 ~# G3 ]4 o  }

* ?" }; W  E# h  W/ h  a# \/ X+ ]使用分离机分离时,采集人员肯定都是按照采集MNC的设定流程操作,这个应该不会错吧。. E7 _8 G  L0 L1 D% A' N
您指的杂细胞是指什么细胞呢,转袋过滤是要过滤掉什么成分呢?
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12楼
发表于 2013-6-14 13:52 |只看该作者
回复 chenguangyu 的帖子# g2 H. u1 H& }2 L4 C; Z0 G) G: R
  J" u- x9 w2 \, F' Y: h& X
请问你们是用分离机采集MNC吗?0 i" S/ t9 f3 V2 L( U3 c
我感觉细胞转袋之后第二天看时,培养袋底部有一层膜状物质,用手轻按就会浮起来变成絮状,在显微镜下观察这些絮状物发现,絮状物都是细胞粘连在一起,这样对细胞后续培养会有什么影响呢?1 k. E4 e" a; p, G8 V! d5 H6 r
到底为什么这些细胞会粘连在一起呢?还是因为细胞密度太大?抑或是转袋之前没有清洗干净血浆成分?6 f# X. }" Q( Y9 q, S
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13楼
发表于 2013-6-14 13:53 |只看该作者
是单独的这个病人还是所有的病人都是这样的?
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14楼
发表于 2013-6-14 13:53 |只看该作者
回复 lizzy_81 的帖子
. M$ Y* {$ s6 i4 L# \  i
. m. Z& {% B8 c5 z% e; I& Z嗯,也许有这个原因,以后制备时注意一下

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15楼
发表于 2013-6-14 13:55 |只看该作者
回复 lyj-0017 的帖子3 U( y9 Z( H) J: I6 h$ [$ l8 V- n% p/ q

8 |2 z% @+ h. ?直接采集~~  “同一个人的两个培养袋,一个出现絮状物,一个却是长得不错” 这个就比较奇怪了。你们是用一步法分离外周血mnc吗?
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16楼
发表于 2013-6-14 13:55 |只看该作者
回复 sheepthief 的帖子
8 P$ C) Y0 F  n4 I: W
% R8 Q+ }8 k* F1 U  K" s是有的病人这样,有的不这样,并且,有的病人刚开始时还没有,但是培养几天之后才变成这样,您给帮忙分析一下

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17楼
发表于 2013-6-14 13:59 |只看该作者
回复 孙帅帅 的帖子* m% c: X6 P3 u$ `* T9 y
7 Q7 |: t9 h5 P+ R+ d6 I
是啊,我也很奇怪为什么会这样。5 n% Q1 q0 ?7 {8 ~0 }- ?# x/ ^2 K6 q
我们是使用分离机采集MNC,而不是直接采血,你们是采集50-100ml外周血进行分离吧?
0 F: q" n) Z7 o. h  u什么是一步法分离外周血MNC?

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18楼
发表于 2013-6-14 16:16 |只看该作者
有没有添加血浆?若是有,血浆最多只能加1.5%含量
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19楼
发表于 2013-6-14 16:24 |只看该作者
又一次我添加了3%血浆,第二天观察出现跟楼主一样的情形,判断可能是由于血浆浓度加高了

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20楼
发表于 2013-6-14 16:56 |只看该作者
回复 lyj-0017 的帖子
: d9 n0 Z$ j  L+ x' _' @
( y1 k1 K! v4 r% ?* _- L$ U1 j" [就是用Ficoll分离外周血MNC,这样分离的比较纯~~  我们都是用一步法分离的,你去网上找找 很简单的!
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