PBMC掺杂红细胞会如何

fay898

贴壁培养纯化细胞，但细胞计数、接种密度上会影响目的细胞的生长~~建议PBMC用红细胞裂解液处理一下再培养吧~
  R4 x( H4 X2 z: F1 ~

流泪的鱼

如果掺杂的红细胞太多，就用红细胞裂解液处理，但是时间要短，否则影响单核细胞的分裂增殖哦。如果红细胞不太，就不用红细胞裂解液。毕竟，红细胞裂解液也会影响单核细胞。

流泪的鱼

你的上升和下降的加减速度怎么设定的？掺杂红细胞和离心方式有关。

流泪的鱼

你的上升和下降的加减速度怎么设定的？掺杂红细胞和离心方式有关。

easternliu

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加速度都是降到最低，这没问题，，谢谢你

小公

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用的GE 的FICOLL ,之前几次是先用淀粉沉淀红细胞，取上清再进行分离液分离，这两次是直接分离的，明显后面红细胞很多，估计是和稀释有关的，稀释倍数低，红细胞密度大，容易下沉，再往分离液加血时候，很快就有红细胞沉降，液面分层不清晰，会影响的，我用的400g,30min ，

easternliu

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你是做的脐血么，做外周血用400g30min应该是完全没问题的。看文献，淀粉直接就低速离了（60g10min），或者自己沉降1h，一直没试过用羟乙基淀粉来做，给点建议吧

weijunning

如果红细胞太多，分离当天用裂解液稍微裂解一下即可，待细胞生长到5天左右，再次进行深度裂解，这样对PBMC的损伤小一些，而且红细胞也更易裂解，裂解效果会好。  

yanwu_1

就我个人的经验来说，少量的红细胞对单核细胞的增值是没有显著影响的；但红细胞太多的话，在红细胞裂解之后，细胞碎片或者（蛋白？）会粘连细胞聚成团，极度影响细胞增殖，甚至会增值不起来。个人经验。

easternliu

回复 小公 的帖子6 `7 E1 T6 [0 r. U) u) o

- J2 O0 c1 l3 P能告诉我你们用的什么牌子的淀粉么，一般药用级的可以用否