PBMC掺杂红细胞会如何

easternliu

回复 yanwu_1 的帖子# r3 [; [/ F5 o  {, @
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我现在遇到的应该如你所说，蛮尴尬的，正着力解决这问题

小公

回复 yanwu_1 的帖子0 D! G5 D( \& ^7 F1 m
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是的，裂解之后明显很多碎片

小公

回复 easternliu 的帖子- t) N- O' o. k) R
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不是医用的，是沉淀红细胞专用的，羟乙基淀粉

easternliu

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哦哦，能推荐一下牌子吗

meister

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红细胞没有太多影响， 不用管它

jenvy121

不建议用红细胞裂解液，影响表型，而且会损失很多目的细胞，建议第一次分离后养上3-5天，然后再次分离，这样很多红细胞就能分走了。

jingjing6837

红细胞多，可以用离心去除一部分，把转数调低一些，只把单核离下来就好，最好不用裂解液对细胞有损伤，要是去不净在用

wenwen1228

正确操作不会掺杂太多红细胞。，就算有对细胞培养影响不大。因为加的因子都是刺激淋巴细胞分裂增殖的，红细胞几乎不增殖。

kangyi08321

FICOLL分离比较好的话一般不会参杂很多红细胞，对于楼上所说的血液粘稠度对分离的影响来说，只要不是太稠的话，影响不是很大！个人做分离很多次，分离不好的原因我发现的有这个，所有15 ml离心管分离的话，最好FICOLL和血液的整个体积不要超过10 ml，50 ml离心管处理的话最好不要超过30-35 ml，一般都能得到好的离心效果。还一个如果血液粘稠度比较高的话，血液加在ficoll液面层上不要分层太好，也对后面离心后，白膜层上残留尽可能少的红细胞有一定帮助，但是相对白膜层液面会厚很多（但不是细胞多啊，就是变稀了而已），后面有肯能需要吸更多液体了。1500-2000rpm ，15 min我都用过，差不多。离心机平稳点更好。有空上传下以前我离心的照片，希望对大家有帮助，不对之处，敬请指正。最后希望版主给点包包下载点东西看看。。。。HOHOHO

aaronbct

I also add Ficol for Red cell depletion. that only remain less than 1% of red cell.) n  m+ o+ `$ A( L