骨髓间充质干细胞的成骨诱导，附图

sdzysp

请各位帮忙看看我这个是不是诱导成功了呢？
' q5 @% m9 Z8 W& a成骨诱导液诱导了14天
- q6 E7 D$ p4 K* Y' g: K( F1 q- _4 H4 @. R' }' s( y
茜素红染色：
# J8 Z- h! R2 }8 f2 Xa.  6孔板去培养基，PBS洗涤2遍，每次5min。
8 R( S, F; z: R1 F8 a/ Cb.  4%多聚甲醛室温固定30min。
; Z7 y. E  v' p: }4 u7 Vc.  吸出固定液，PBS洗涤2遍。3 M& M4 A; H  [$ |7 c4 C8 u: s
d. 用1%茜素红染液染色30min。$ K7 @7 S/ z, M6 m- X
e. 吸出染液，蒸馏水洗涤，将蒸馏水吸弃干净。7 N; e9 Q# y' S" ^7 {
; Y/ V% N8 }& n, q) l
阴性对照- R: v5 T7 }& k6 l& T4 h; [0 r

  C2 q+ b! B+ ?5 v  v* m4 c成骨诱导
& p1 m' O3 B9 H; D/ W5 N$ q9 f
3 ?1 B& L0 u. m. ^" d& s
# I* v/ J% d: Y

13122422967

应该是成功了

ytumuyangren

楼主成骨诱导很不错，很明显的钙结节，恭喜恭喜。

sdzysp

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. ?8 e) K; w$ L1 G; i1 c$ f+ q* Y  A" \/ ?8 K, }2 z5 e/ T$ }, J
可是我还是觉得有点问题，最后洗涤的时候有点麻烦，洗了N多次，下次是不是可以染色时间短一点呢？

ytumuyangren

回复 sdzysp 的帖子$ y7 O: w2 Y8 _+ Z2 N
& d8 V1 ?7 z+ R: W# V0 k. d+ Q  p
你可以尝试一下，我们在染色的时候也都是30min。

xuzhijuan1989

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! _/ Y, u+ e' G' D$ d7 z- n: o
, z& `& l+ x. W1 I+ e请教下，你的茜素红是怎么配置的呢？我用tris-hcl(ph8.3)配置的是紫色的，细胞染得也是紫色，谢谢了！

sdzysp

回复 xuzhijuan1989 的帖子( I- h4 `5 W5 i) s6 M
9 ?7 g0 C/ e5 D" K
茜素红1g，加蒸馏水100ml溶解，再用氨水调节PH为4.1，临用前过滤

sdzysp

( o4 d' B, v+ w" C, k, u( P3 W" P2 L
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, d4 i( L# ?# ?1 g6 o: f1 q
0 Y: I6 A  N6 `( ~/ W1 J+ s4 D3 Q发现问题了，可能上次过滤的茜素红不彻底，还有渣子，这次的就好一些，最后洗涤容易多了！看这次是不是背景干净多了呢？
9 E3 d& D" r; t$ K8 N8 o阴性对照: o+ c6 D* j, s& Q: Q
成骨诱导

沁蓝之城

请问一下你用的诱导液是自己配的还是现成的试剂。我买的gibco的现成诱导液，但效果很不理想

sdzysp

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0 e* t  O" `1 T) G! \4 C* ^" G7 {  T* [+ P) z
我的诱导液都是是自己配的