骨髓间充质干细胞的成骨诱导，附图

sdzysp

请各位帮忙看看我这个是不是诱导成功了呢？
1 }7 w5 Q) p; B2 m. n0 s成骨诱导液诱导了14天9 v. v$ D4 R2 Y5 v. K" `2 d
; ?" X5 ~# v- f
茜素红染色： 3 H: I( _! {# ^: R2 h8 q5 R
a.  6孔板去培养基，PBS洗涤2遍，每次5min。. o5 f; D! J( o! h0 V, W
b.  4%多聚甲醛室温固定30min。, E# g+ U  ^7 P# \8 A' u
c.  吸出固定液，PBS洗涤2遍。
. |- K+ |; j+ h% wd. 用1%茜素红染液染色30min。
+ B2 L4 ~' m; o$ _0 C6 X5 u* le. 吸出染液，蒸馏水洗涤，将蒸馏水吸弃干净。2 L! p- j# Z( u) r
6 O4 @2 i/ a, E' t( A+ s+ q
阴性对照, M" B/ a' [1 K6 |% {* _

* B8 W- u' i" t4 H成骨诱导
, B0 `* w* u1 @( D: ^! t( a: h+ _# ~& f

. I( K' m0 [. C: T# J. `- D' s- O8 }" M7 c- l* T" S+ u

13122422967

应该是成功了

ytumuyangren

楼主成骨诱导很不错，很明显的钙结节，恭喜恭喜。

sdzysp

回复 ytumuyangren 的帖子9 Z) }  L$ S3 k- t3 b" w0 T! L/ p

; g9 m! n: ]4 ?6 V可是我还是觉得有点问题，最后洗涤的时候有点麻烦，洗了N多次，下次是不是可以染色时间短一点呢？

ytumuyangren

回复 sdzysp 的帖子2 Y1 M9 m2 E( [
7 e4 @8 v0 R0 a/ E+ o: [
你可以尝试一下，我们在染色的时候也都是30min。

xuzhijuan1989

回复 sdzysp 的帖子3 J& z2 S( `8 m3 d8 _2 U

0 X' k, ~0 i0 S( X" w, {- K; v# y请教下，你的茜素红是怎么配置的呢？我用tris-hcl(ph8.3)配置的是紫色的，细胞染得也是紫色，谢谢了！

sdzysp

回复 xuzhijuan1989 的帖子
' x; H9 M" ^  {: U% X  d/ r" `6 m
! h, X/ z) V7 V! F" A茜素红1g，加蒸馏水100ml溶解，再用氨水调节PH为4.1，临用前过滤

sdzysp

; B3 ^* G2 Y7 c" S/ k

5 ^! G6 T5 A$ C回复 ytumuyangren 的帖子& G! F# ]) {) P7 K1 [4 n7 H) c" X
: J3 U2 ?. V- N: J
发现问题了，可能上次过滤的茜素红不彻底，还有渣子，这次的就好一些，最后洗涤容易多了！看这次是不是背景干净多了呢？
  ]- F6 w( L) P6 x8 u阴性对照
. P/ H5 ~1 j) M, A' ?$ V* u, s成骨诱导

沁蓝之城

请问一下你用的诱导液是自己配的还是现成的试剂。我买的gibco的现成诱导液，但效果很不理想

sdzysp

回复 沁蓝之城 的帖子
' Q* P' ]- z1 t% {6 g- a
  a& L9 _- Q% Z  F9 l/ i; T8 v8 |4 z我的诱导液都是是自己配的