CIK加液后产生絮状物，大家来分析一下原因！！！

sunny.yc

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5 N. i9 q) `8 ^/ x, V1 K' D$ {3 ~5 N. u+ r. B% a, I& V- a% c
你的量是从哪看到的，都太高了吧，试试1000单位的干扰素γ，D0天一般只加干扰素

lyj-0017

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# y  D- o8 ]- d. S7 K+ s9 a+ j4 W* D- K
记错了，IFN-r应该是1000U/ml。现在纠结的问题就是到底可不可以D0天三种细胞因子同时加？与传统工艺效果哪个更好一些。。。

sunny.yc

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7 R* ~5 t' T5 A. Q0 s, o" p  O! G; p2 r9 V: H
建议还是分开加，挺多文献都有这样的描述，而且理论看起来都很合理的
6 h1 E8 ~' m) N" z1 G$ _2 J' v  y
' }  k& b! W4 }3 W- T  I如果你还是在纠结的话，建议你连续做几个平行实验看看，可能对于你的培养体系来说，D0加一种或加三种影响不大呢

lyj-0017

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7 T: |& r# j* @: \; T$ Z( s8 X' M1 v5 [( `& Q/ I) }
最近看文献看到有这么做的，D0天添加IFN-r和anti-CD3 mAb,第二天添加IL-2，后续培养以IFN-r和IL-2维持，按文献所说扩增倍数还挺高的~

sunny.yc

回复 lyj-0017 的帖子' }# [3 d# c1 Y8 M8 a8 }

; M) w& C0 z% I0 Z1 e* y可能我了解得还太少，持续加干扰素还是第一次听到，试试看吧！

jenvy121

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% e1 U5 V9 g  A
- `6 k5 ]8 I% V6 E不知你们的培养体系有多大？一般用多少预热多少，而且预热的时间也不长，不会出现很大的酸碱失衡吧

lyj-0017

回复 jenvy121 的帖子% j6 E: S# R9 G# ^' R

, g/ P  }6 S' B培养体系得看分离得到的单个核细胞数量，根据5~10X10^5/ml的细胞密度铺袋。你后面说的预热多少没看懂，应该是问预热多少培养基吧？一般预热一瓶培养基，培养基手感不那么凉即可添加。酸碱失衡我觉得不可避免，但是不会出现太大失衡~

jenvy121

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* m+ w- G9 \" @2 `  n5 P) w9 I1 d) v+ u  x; h. V" W+ S
对的，我们每次换液计算好用的培养基的量，然后预热

lyj-0017

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/ F( o0 x. J/ H. y1 d
1 [' T3 Z- D0 t7 l- P6 m你们用的是机采吗？还是直接采外周血？现在培养一次最多能获得多少细胞呢？

jenvy121

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5 u" n" C0 w" z& ]3 _- v2 J9 b: ]9 t' p5 N( b! \+ J6 X% Q* Q
直接采外周血，数量也是因人而异吧