CIK加液后产生絮状物，大家来分析一下原因！！！

sunny.yc

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1 K: M, r+ d) X& V/ b7 @) Y( _4 W7 r6 j6 K3 {. v% ~' Z' Y
你的量是从哪看到的，都太高了吧，试试1000单位的干扰素γ，D0天一般只加干扰素

lyj-0017

回复 sunny.yc 的帖子" r' t7 I4 e2 M, ?! i0 F

  g: |8 r9 L% C2 y记错了，IFN-r应该是1000U/ml。现在纠结的问题就是到底可不可以D0天三种细胞因子同时加？与传统工艺效果哪个更好一些。。。

sunny.yc

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/ |9 j, V6 g, S: p) _( N* b  z% s# x8 g- Y$ I
建议还是分开加，挺多文献都有这样的描述，而且理论看起来都很合理的% _$ z7 K: G3 j. h! _

7 F: L( e0 K2 x( f如果你还是在纠结的话，建议你连续做几个平行实验看看，可能对于你的培养体系来说，D0加一种或加三种影响不大呢

lyj-0017

回复 sunny.yc 的帖子0 L( C: a7 c' r8 |" T$ r% P

* h" r6 Q: c6 V7 E; F( S最近看文献看到有这么做的，D0天添加IFN-r和anti-CD3 mAb,第二天添加IL-2，后续培养以IFN-r和IL-2维持，按文献所说扩增倍数还挺高的~

sunny.yc

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% m& s# y. e+ }! ~( R
+ s, Y' P& e. u) [7 X( b8 H可能我了解得还太少，持续加干扰素还是第一次听到，试试看吧！

jenvy121

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% @0 M. m  a- M7 n& P. L5 @8 ~: O: T4 y$ p' y2 n: `+ N8 |
不知你们的培养体系有多大？一般用多少预热多少，而且预热的时间也不长，不会出现很大的酸碱失衡吧

lyj-0017

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+ G! a# u* ~* H5 w4 p, A1 m$ H3 l+ R" S( @
培养体系得看分离得到的单个核细胞数量，根据5~10X10^5/ml的细胞密度铺袋。你后面说的预热多少没看懂，应该是问预热多少培养基吧？一般预热一瓶培养基，培养基手感不那么凉即可添加。酸碱失衡我觉得不可避免，但是不会出现太大失衡~

jenvy121

回复 lyj-0017 的帖子; y$ r9 ?) e" F+ w/ \/ x6 q7 f

2 J% r, K+ @+ G) s' X; C5 N对的，我们每次换液计算好用的培养基的量，然后预热

lyj-0017

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, ], k  c. o4 y& h2 Y8 l
& T5 d4 {9 S. q你们用的是机采吗？还是直接采外周血？现在培养一次最多能获得多少细胞呢？

jenvy121

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( y( M0 E9 l" s& w2 R7 {. f( O+ @+ @
直接采外周血，数量也是因人而异吧