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慢病毒 PEG-8000浓缩法 [复制链接]

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楼主
发表于 2013-7-4 16:03 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
PEG-8000浓缩法:) m* Z; ]3 Y8 S
1. 5X PEG8000+NaCl配制 称取NaCl 8.766 g; PEG8000 50g溶解在200ml Milli-Q纯水中;121摄氏度 30min 湿热灭绝 30min;保存在4℃。2. 滤头过滤慢病毒上清液;3. 每30ml过滤后的病毒初始液,加入5X PEG-8000+NaCl母液7.5 ml;4. 每20~30min混合一次,共进行3-5次;5. 4度放置过夜;6. 4度,4000 g,离心 20min;7. 吸弃上清,静置管子1~2分钟,吸走残余液体;8. 加入适量的慢病毒溶解液溶解慢病毒沉淀;9. 集中后的病毒悬液分装成50 μl每份,保存在成品管中。用碎干冰速冻后储存在-80 ℃
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沙发
发表于 2013-7-5 10:48 |只看该作者
回复 bishengrong2011 的帖子/ Z: y% K/ J7 Y# \0 _, x) ^$ I
) g- l1 Z- U+ z) f
非常好。谢谢!你们自己使用效果怎么样?

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藤椅
发表于 2013-7-6 19:27 |只看该作者
效果还不错,但是还是有些杂质,现在主流还是超滤,和超离
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板凳
发表于 2013-7-6 19:27 |只看该作者
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# N! M( j1 N3 k9 O& K! N- q5 |, @2 O4 N6 K( ~0 M6 p9 s1 t
效果还不错,但是还是有些杂质,现在主流还是超滤,和超离 5 M* O4 z! j, a0 G3 ?! Z) I5 x2 b
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