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包包
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小小研究员

楼主
发表于 2013-7-22 20:38 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
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24孔板每空大约加1.5ml甲基纤维素培养基,接种1*105个细胞培养14天后,倒置显微镜观察 细胞铺满了每孔,就是集落很少   什么原因啊?一直在纠结这个问题啊?
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沙发
发表于 2013-7-23 14:47 |只看该作者
密度太高了,我上次也做了一次,但是还有些集落的,如果密度太高的话就会很密密麻麻,然后做的时候是不是保持湿度了呢?24孔板不需要加那么多的培养基吧,营养过了~~
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藤椅
发表于 2013-8-23 01:21 |只看该作者
存在两个问题:1、培养基量太大,大约0.2ml就足够。2、细胞数量太多,降低10倍数量差不多
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板凳
发表于 2013-8-24 14:37 |只看该作者
接种的是死细胞
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报纸
发表于 2013-8-24 14:38 |只看该作者
或者干祖细胞太少

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金话筒 优秀会员

地板
发表于 2013-9-13 16:06 |只看该作者
我觉得您甲基纤维素加的太多导致看不到集落的可能性比较大。可以用48孔板,每孔加入0.2ml甲基纤维素,接种1*104个细胞就可以了
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7楼
发表于 2015-10-21 21:22 |只看该作者
24孔板里不需要加这么多细胞的,我一般加800~1200个每孔就行,最后就长了好多集落。
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