谁有悬浮细胞球培养经验

Leipzig

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非常感谢，我以前没养过悬浮细胞，刚开始，发现很多问题，上次本来长的很好，我换了次营养液，只换一半，后来发现一些碎的死细胞，不知道是球太大老化了，还是不适应新溶液，还是我操作过猛。# t0 |+ Y  \7 n( j6 z/ o
有的细胞球很大，有的很小，很难判断是否要传代，以大球为准吗？
+ ~/ m; u5 I2 p# V/ Q7 R有时细胞会自己聚集在一个区域内，很密集，其他地方几乎没有细胞，这样是常见现象吗？
5 G0 D5 p- s! }7 P% F如果部分细胞出现贴壁应该怎么办呢？

Leipzig

回复 fengjh100 的帖子$ ~# M& A( D7 f9 p3 {7 V1 A
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非常感谢，我以前没养过悬浮细胞，刚开始，发现很多问题，上次本来长的很好，我换了次营养液，只换一半，后来发现一些碎的死细胞，不知道是球太大老化了，还是不适应新溶液，还是我操作过猛。
+ `! }: q) x$ f7 L8 T  P有的细胞球很大，有的很小，很难判断是否要传代，以大球为准吗？( S3 j; X  U8 Y; D! e- y
有时细胞会自己聚集在一个区域内，很密集，其他地方几乎没有细胞，这样是常见现象吗？. F! ^* O! p: T5 a4 j0 U. L' e
如果部分细胞出现贴壁应该怎么办呢？

fengjh100

不好意思，近期由于实验繁忙，没有及时到这里回复，见谅！3 s' ^) n7 \' S' ]0 \9 s
出现贴壁的情况还是比较常见的，一般是饲养环境所致，部分是饲养时间过久，细胞老化所致。解决办法有：1是用3D培养，其实可以简略些，用琼脂糖铺底板，这个经验坛子里说明的已经很多很常见了；2是加入一些抑制分化的因子，如白血病抑制因子等。传代的判断不好界定，靠经验吧，摇动后发现絮状沉淀比较多的情况下，需要及时传代了。建议细胞成熟后及时使用，尽量不要传代，因为可能出现变异。且状态不良。每天都尽量摇动悬浮的细胞，可以避免出现不均的情况，也可促进其球体形成。" H! j3 l! D& m) O

lily132

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你好fengjh100,
; }. x) Z: ?, A  |请问你是如何消化细胞球的呢？用什么消化酶，多长时间？你做过U251细胞没呢？