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金话筒 优秀会员 帅哥研究员

楼主
发表于 2013-7-31 10:13 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
求教:TALEN技术可以用于造血干细胞的体外敲除么?时间要多久?成功率怎么样呢?要不要筛选?' T4 Q0 g5 g3 R3 D0 a, j
求各路大神指点啊,不甚感激!
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沙发
发表于 2013-7-31 16:24 |只看该作者
TALEN技术可以用于造血干细胞的体外敲除,时间要看你细胞培养水平、转染效率还有TALEN的靶向切割效率等。TALEN的靶向切割效率跟你要靶向修饰的基因有关,如果要是想要获得高阶的细胞系的话,就需要进行筛选并挑选单克隆。
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藤椅
发表于 2013-8-1 10:23 |只看该作者
回复 daiying5200000 的帖子
- j% a% S2 [3 ~- ^
) J; v8 U$ }5 U- E1 x+ t9 N首先回答你,原理上是没有问题的,问题在于:& h0 o& u1 L2 `
1. 如何导入TALEN;2 a$ Z& h8 j" _' z6 G
2. 用什么启动子;
; B( p3 `' p0 T( C3. 如何筛选;  E: @8 Z( g" }
4. 筛选时会不会产生意外的插入;
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板凳
发表于 2013-8-1 10:32 |只看该作者
干细胞之家微信公众号
回复 xiangchou812 的帖子5 r$ {, m! x* V. n$ \% w! X
! }( h$ O) v; G: z1 d4 H
好的,非常感谢!

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发表于 2013-8-1 10:33 |只看该作者
回复 weiyepan 的帖子# T1 G' r1 Z* z; g4 Q/ }
0 k3 m) |4 O1 {8 r) Q
谢谢给的意见,我会继续查询相关资料。

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发表于 2013-8-1 17:32 |只看该作者
用cas9吧
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