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daiying5200000

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金话筒优秀会员帅哥研究员

楼主

发表于 2013-7-31 10:13 |只看该作者 |倒序浏览 |打印

求教：TALEN技术可以用于造血干细胞的体外敲除么？时间要多久？成功率怎么样呢？要不要筛选？( R$ m' v/ n5 N! A' A) W ^& s
求各路大神指点啊，不甚感激！

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优秀会员金话筒

沙发

发表于 2013-7-31 16:24 |只看该作者

TALEN技术可以用于造血干细胞的体外敲除，时间要看你细胞培养水平、转染效率还有TALEN的靶向切割效率等。TALEN的靶向切割效率跟你要靶向修饰的基因有关，如果要是想要获得高阶的细胞系的话，就需要进行筛选并挑选单克隆。

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weiyepan

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藤椅

发表于 2013-8-1 10:23 |只看该作者

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7 `) H1 G. R; w- h7 m
首先回答你，原理上是没有问题的，问题在于：" o. L) \. @; B: {, u# }& h7 u
1. 如何导入TALEN；
2. 用什么启动子；
3. 如何筛选；) B( a+ q5 l- j7 ]: V7 S( X5 F
4. 筛选时会不会产生意外的插入；