转染到干细胞后，GFP检测不到，原因有哪些 - 实验室综合讨论区干细胞之家

干细胞之家 - 中国干细胞行业门户第一站 › 干细胞之家论坛 › 干细胞实验室技术交流 › 实验室综合讨论区 › 转染到干细胞后，GFP检测不到，原因有哪些



免疫细胞治疗专区	欢迎关注干细胞微信公众号

返回列表

查看: 25452\|回复: 5	go [请教] 转染到干细胞后，GFP检测不到，原因有哪些 [复制链接]

arneyda

新手上路

Rank: 1

积分: 3
威望: 3
包包: 20

楼主

发表于 2013-8-14 22:02 |只看该作者 |倒序浏览 |打印

转染到干细胞后，GFP检测不到，原因有哪些

已有 1 人评分	威望	包包	收起理由
细胞海洋	+ 1	+ 5	欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 1 包包 + 5 查看全部评分

收藏0 分享0 顶0 踩0

回复引用

举报返回顶部

fguw

中级会员

Rank: 3 Rank: 3

积分: 397
威望: 397
包包: 1222

金话筒优秀会员

沙发

发表于 2013-8-14 22:45 |只看该作者

最可能的有2种原因，第一，转染效率太低，2，载体有问题，

已有 1 人评分	威望	包包	收起理由
细胞海洋	+ 5	+ 10	欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 5 包包 + 10 查看全部评分

回复引用

举报返回顶部

neuralstem

注册会员

Rank: 2

积分: 72
威望: 72
包包: 190

藤椅

发表于 2013-8-15 00:12 |只看该作者

promoter太弱。 CMV在干细胞里不表达或者活性低很正常

已有 1 人评分	威望	包包	收起理由
细胞海洋	+ 5	+ 10	欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 5 包包 + 10 查看全部评分

回复引用

举报返回顶部

username

金牌会员

Rank: 6 Rank: 6

积分: 3495
威望: 3495
包包: 4879

优秀会员金话筒

板凳

发表于 2013-8-15 10:04 |只看该作者

同意楼上启动子选择不当的意见。在干细胞中建议使用CAG、EF1a启动子，不要使用CMV。GFP建议使用亮度更高的Venus等替换。

已有 1 人评分	威望	包包	收起理由
细胞海洋	+ 6	+ 15	欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 6 包包 + 15 查看全部评分

回复引用

举报返回顶部

fguw

中级会员

Rank: 3 Rank: 3

积分: 397
威望: 397
包包: 1222

金话筒优秀会员

报纸

发表于 2013-8-16 08:09 |只看该作者

似乎楼上都是做人胚胎干的？
首先需要了解是什么干细胞？有文献支持？: X3 m) g t! M, O: e
载体，是不是对？有gfp吗？载体在其他细胞中验证过？
转染效率肯定没有问题？) g; {7 t" `3 y! m# m; A( @/ @
这些都是需要在做实验前先了解的 s! r2 E1 v" w P# @