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楼主: rammy
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新人求助 用丝裂霉素处理过的饲养层细胞复苏后问题···   [复制链接]

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发表于 2013-9-2 09:29 |只看该作者
回复 panzz76 的帖子2 q# f7 @. N& k. S
* C9 R( X  I" p7 _
这个细胞是应急时候用的,因为正常传代的细胞污染了,所以必须要临时复苏,铺板长胚胎干

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发表于 2013-9-2 09:30 |只看该作者
回复 w343989328 的帖子
3 }& g: g) d5 K( M2 s1 ?' K6 R$ z0 K) A8 @9 i  t1 `
不同管的细胞状态不同,混用不会有影响么?

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发表于 2013-9-2 09:31 |只看该作者
回复 星光灿烂 的帖子, R$ f( f; a4 P+ C2 x

8 P# D1 r  y) [* K谢谢指教哦!

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发表于 2013-9-2 11:07 |只看该作者
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回复 rammy 的帖子
/ y1 n& T& K5 H" C2 m) T; @3 C6 z0 S( E+ i' y, {. H
呵呵,那是我弄错了,呵呵

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发表于 2013-9-4 12:24 |只看该作者
状态问题不大) I; J, U: e4 s6 z. {( }/ t
只要能正常分泌因子就可以了
; ~3 J3 g  [7 V0 I8 S- L问一句,你们养了干细胞与饲养层细胞能区分开吗,形态上能区分开吗
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发表于 2013-9-5 19:32 |只看该作者
回复 panzz76 的帖子2 g, a5 |+ P, v+ e

: h( `- o) J% t可以的啊,我们的胚胎干很明显的团块状,大小比一般细胞大多了,饲养层细胞则是铺开的长梭形
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发表于 2013-9-5 22:20 |只看该作者
我们一般都是丝裂霉素处理好细胞后,计数按2*10六次方 或者1*10七次方等冻存成一只, 每次用按需要复苏使用,一般不消化再用的。你如果复苏出来后,我觉得应该先计数,然后按你要的量铺,一般10cm盘或者48孔都用2*10六次方就够了。
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发表于 2013-9-13 09:55 |只看该作者
回复 琳茗 的帖子: w- y6 S9 a% B1 _; i
7 y/ `$ p2 k- Q+ Z* A% N* r
谢谢亲!

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发表于 2013-10-14 20:42 |只看该作者
丝裂霉素处理后细胞是不会在增殖了,用来铺板的话,100mm平皿建议2x10*6每皿。饲养层细胞冻存的时候做个计数,用的时候直接铺就行了。
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发表于 2013-10-16 11:01 |只看该作者
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