新人求助 用丝裂霉素处理过的饲养层细胞复苏后问题···

rammy

回复 panzz76 的帖子2 q# f7 @. N& k. S
* C9 R( X  I" p7 _
这个细胞是应急时候用的，因为正常传代的细胞污染了，所以必须要临时复苏，铺板长胚胎干

rammy

回复 w343989328 的帖子
3 }& g: g) d5 K( M2 s1 ?' K6 R$ z0 K) A8 @9 i  t1 `
不同管的细胞状态不同，混用不会有影响么？

rammy

回复 星光灿烂 的帖子, R$ f( f; a4 P+ C2 x

8 P# D1 r  y) [* K谢谢指教哦！

haijing12585

回复 rammy 的帖子
/ y1 n& T& K5 H" C2 m) T; @3 C6 z0 S( E+ i' y, {. H
呵呵，那是我弄错了，呵呵

panzz76

状态问题不大) I; J, U: e4 s6 z. {( }/ t
只要能正常分泌因子就可以了
; ~3 J3 g  [7 V0 I8 S- L问一句，你们养了干细胞与饲养层细胞能区分开吗，形态上能区分开吗

rammy

回复 panzz76 的帖子2 g, a5 |+ P, v+ e

: h( `- o) J% t可以的啊，我们的胚胎干很明显的团块状，大小比一般细胞大多了，饲养层细胞则是铺开的长梭形

琳茗

我们一般都是丝裂霉素处理好细胞后，计数按2*10六次方 或者1*10七次方等冻存成一只， 每次用按需要复苏使用，一般不消化再用的。你如果复苏出来后，我觉得应该先计数，然后按你要的量铺，一般10cm盘或者48孔都用2*10六次方就够了。

rammy

回复 琳茗 的帖子: w- y6 S9 a% B1 _; i
7 y/ `$ p2 k- Q+ Z* A% N* r
谢谢亲！

wqh

丝裂霉素处理后细胞是不会在增殖了，用来铺板的话，100mm平皿建议2x10*6每皿。饲养层细胞冻存的时候做个计数，用的时候直接铺就行了。

流霞淌