新人求助 用丝裂霉素处理过的饲养层细胞复苏后问题···

rammy

回复 panzz76 的帖子; U- V$ @0 c3 A$ L2 Y0 C

2 a: u  ^. t9 e. I) L这个细胞是应急时候用的，因为正常传代的细胞污染了，所以必须要临时复苏，铺板长胚胎干

rammy

回复 w343989328 的帖子
$ R2 j# A; a% u/ W: p4 o: S1 F0 e8 P. l. ]' B
不同管的细胞状态不同，混用不会有影响么？

rammy

回复 星光灿烂 的帖子
% E$ C" [6 [5 @5 |$ h: E8 {
" W4 V% P6 s% J: S谢谢指教哦！

haijing12585

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- [4 K# i5 ?1 Y  U
0 y9 R) k* O- j1 e呵呵，那是我弄错了，呵呵

panzz76

状态问题不大( ^6 r- |" H1 W' E0 g
只要能正常分泌因子就可以了
) T2 d4 B# i& C7 Q- w问一句，你们养了干细胞与饲养层细胞能区分开吗，形态上能区分开吗

rammy

回复 panzz76 的帖子' @0 A& a; p: t* X% o, ~* h4 e
: w8 W+ Z; [5 S) K  Z' J# \, b* @
可以的啊，我们的胚胎干很明显的团块状，大小比一般细胞大多了，饲养层细胞则是铺开的长梭形

琳茗

我们一般都是丝裂霉素处理好细胞后，计数按2*10六次方 或者1*10七次方等冻存成一只， 每次用按需要复苏使用，一般不消化再用的。你如果复苏出来后，我觉得应该先计数，然后按你要的量铺，一般10cm盘或者48孔都用2*10六次方就够了。

rammy

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! e! E8 C: b6 J; A9 Y+ R) B8 p8 ^/ u2 J' F( o2 [
谢谢亲！

wqh

丝裂霉素处理后细胞是不会在增殖了，用来铺板的话，100mm平皿建议2x10*6每皿。饲养层细胞冻存的时候做个计数，用的时候直接铺就行了。

流霞淌