新人求助 用丝裂霉素处理过的饲养层细胞复苏后问题···

rammy

回复 panzz76 的帖子
0 g9 E' z+ d2 A* k/ U, U0 y6 Q$ T+ C1 E" y9 u* o
这个细胞是应急时候用的，因为正常传代的细胞污染了，所以必须要临时复苏，铺板长胚胎干

rammy

回复 w343989328 的帖子
+ `& a/ M" F& j4 B) |  d3 w5 U+ g! J# ~, U6 ~
不同管的细胞状态不同，混用不会有影响么？

rammy

回复 星光灿烂 的帖子
. C* H' a, F( G4 T4 o& Q7 P
- G, }9 [: `" Z2 L谢谢指教哦！

haijing12585

回复 rammy 的帖子7 y' {5 `: w5 S/ l; W
9 I' K- }* p/ n8 c
呵呵，那是我弄错了，呵呵

panzz76

状态问题不大
% e9 A; V. t/ S3 H1 r, w& m; Z只要能正常分泌因子就可以了
' T9 i% g" Y# m0 c问一句，你们养了干细胞与饲养层细胞能区分开吗，形态上能区分开吗

rammy

回复 panzz76 的帖子
+ T' \/ W8 c  V# A1 [8 P# E3 k9 c( o
  T# y8 Q) e# I2 `/ ~7 T可以的啊，我们的胚胎干很明显的团块状，大小比一般细胞大多了，饲养层细胞则是铺开的长梭形

琳茗

我们一般都是丝裂霉素处理好细胞后，计数按2*10六次方 或者1*10七次方等冻存成一只， 每次用按需要复苏使用，一般不消化再用的。你如果复苏出来后，我觉得应该先计数，然后按你要的量铺，一般10cm盘或者48孔都用2*10六次方就够了。

rammy

回复 琳茗 的帖子- C! l0 c# N  B0 d0 {9 p+ V  I

: D6 c# D, a7 ~; K% A4 n谢谢亲！

wqh

丝裂霉素处理后细胞是不会在增殖了，用来铺板的话，100mm平皿建议2x10*6每皿。饲养层细胞冻存的时候做个计数，用的时候直接铺就行了。

流霞淌