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楼主: rammy
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新人求助 用丝裂霉素处理过的饲养层细胞复苏后问题···   [复制链接]

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发表于 2013-9-2 09:29 |只看该作者
回复 panzz76 的帖子
0 g9 E' z+ d2 A* k/ U, U0 y6 Q$ T+ C1 E" y9 u* o
这个细胞是应急时候用的,因为正常传代的细胞污染了,所以必须要临时复苏,铺板长胚胎干

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发表于 2013-9-2 09:30 |只看该作者
回复 w343989328 的帖子
+ `& a/ M" F& j4 B) |  d3 w5 U+ g! J# ~, U6 ~
不同管的细胞状态不同,混用不会有影响么?

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发表于 2013-9-2 09:31 |只看该作者
回复 星光灿烂 的帖子
. C* H' a, F( G4 T4 o& Q7 P
- G, }9 [: `" Z2 L谢谢指教哦!

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发表于 2013-9-2 11:07 |只看该作者
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回复 rammy 的帖子7 y' {5 `: w5 S/ l; W
9 I' K- }* p/ n8 c
呵呵,那是我弄错了,呵呵

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发表于 2013-9-4 12:24 |只看该作者
状态问题不大
% e9 A; V. t/ S3 H1 r, w& m; Z只要能正常分泌因子就可以了
' T9 i% g" Y# m0 c问一句,你们养了干细胞与饲养层细胞能区分开吗,形态上能区分开吗
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发表于 2013-9-5 19:32 |只看该作者
回复 panzz76 的帖子
+ T' \/ W8 c  V# A1 [8 P# E3 k9 c( o
  T# y8 Q) e# I2 `/ ~7 T可以的啊,我们的胚胎干很明显的团块状,大小比一般细胞大多了,饲养层细胞则是铺开的长梭形
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发表于 2013-9-5 22:20 |只看该作者
我们一般都是丝裂霉素处理好细胞后,计数按2*10六次方 或者1*10七次方等冻存成一只, 每次用按需要复苏使用,一般不消化再用的。你如果复苏出来后,我觉得应该先计数,然后按你要的量铺,一般10cm盘或者48孔都用2*10六次方就够了。
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发表于 2013-9-13 09:55 |只看该作者
回复 琳茗 的帖子- C! l0 c# N  B0 d0 {9 p+ V  I

: D6 c# D, a7 ~; K% A4 n谢谢亲!

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发表于 2013-10-14 20:42 |只看该作者
丝裂霉素处理后细胞是不会在增殖了,用来铺板的话,100mm平皿建议2x10*6每皿。饲养层细胞冻存的时候做个计数,用的时候直接铺就行了。
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发表于 2013-10-16 11:01 |只看该作者
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