新人求助 用丝裂霉素处理过的饲养层细胞复苏后问题···

rammy

回复 panzz76 的帖子- q5 y9 [$ P& C6 {+ m

, W: b9 g' X5 ]4 t, T这个细胞是应急时候用的，因为正常传代的细胞污染了，所以必须要临时复苏，铺板长胚胎干

rammy

回复 w343989328 的帖子
  a+ ]2 f/ [. ^/ n  J6 e* I* O2 [" K! X) y/ X! |* I" l
不同管的细胞状态不同，混用不会有影响么？

rammy

回复 星光灿烂 的帖子0 I# F& R7 w; j4 N' r1 u
1 b/ ^1 `+ G; l# ?
谢谢指教哦！

haijing12585

回复 rammy 的帖子/ @& L& v: Q* a1 C! k, D( T! m" j5 O
" r/ [& p1 @5 ?# P3 d, d
呵呵，那是我弄错了，呵呵

panzz76

状态问题不大
% w6 I: j2 J) M  T; B9 f只要能正常分泌因子就可以了/ p4 O: F- Y# Q7 o
问一句，你们养了干细胞与饲养层细胞能区分开吗，形态上能区分开吗

rammy

回复 panzz76 的帖子
* M$ y, H, k/ m; x, D
, \  S, {: }% A# T可以的啊，我们的胚胎干很明显的团块状，大小比一般细胞大多了，饲养层细胞则是铺开的长梭形

琳茗

我们一般都是丝裂霉素处理好细胞后，计数按2*10六次方 或者1*10七次方等冻存成一只， 每次用按需要复苏使用，一般不消化再用的。你如果复苏出来后，我觉得应该先计数，然后按你要的量铺，一般10cm盘或者48孔都用2*10六次方就够了。

rammy

回复 琳茗 的帖子" n1 `  Z/ q7 M. R# q- Z# @6 V
) C6 w4 v% K, f! A2 x) z
谢谢亲！

wqh

丝裂霉素处理后细胞是不会在增殖了，用来铺板的话，100mm平皿建议2x10*6每皿。饲养层细胞冻存的时候做个计数，用的时候直接铺就行了。

流霞淌