新人求助 用丝裂霉素处理过的饲养层细胞复苏后问题···

rammy

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这个细胞是应急时候用的，因为正常传代的细胞污染了，所以必须要临时复苏，铺板长胚胎干

rammy

回复 w343989328 的帖子
2 C6 J8 X; Y, I# _; P6 ?3 q  p
7 M7 K* K  h- W+ u/ ^3 k5 d不同管的细胞状态不同，混用不会有影响么？

rammy

回复 星光灿烂 的帖子8 ^. a' C9 y: g) ^

3 S  U2 H$ q0 |# }) m( f; f& P谢谢指教哦！

haijing12585

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' B) F4 k  Y$ a( l  y6 y9 ^$ ^' s& s3 {+ `- S7 b. g
呵呵，那是我弄错了，呵呵

panzz76

状态问题不大
; E' H$ G4 ~0 _) k, \0 `$ ?0 E只要能正常分泌因子就可以了3 R9 L/ Q* q2 x( Q. l0 {$ d
问一句，你们养了干细胞与饲养层细胞能区分开吗，形态上能区分开吗

rammy

回复 panzz76 的帖子
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可以的啊，我们的胚胎干很明显的团块状，大小比一般细胞大多了，饲养层细胞则是铺开的长梭形

琳茗

我们一般都是丝裂霉素处理好细胞后，计数按2*10六次方 或者1*10七次方等冻存成一只， 每次用按需要复苏使用，一般不消化再用的。你如果复苏出来后，我觉得应该先计数，然后按你要的量铺，一般10cm盘或者48孔都用2*10六次方就够了。

rammy

回复 琳茗 的帖子" X! T6 Z% S, `, f  S) ?8 z+ h
2 }/ T! O4 g7 P% W$ E/ h( T
谢谢亲！

wqh

丝裂霉素处理后细胞是不会在增殖了，用来铺板的话，100mm平皿建议2x10*6每皿。饲养层细胞冻存的时候做个计数，用的时候直接铺就行了。

流霞淌