为什么我的脐带组织贴壁法细胞爬出数量少

xingyuncao

各位大神，我取的脐带约15cm长，利用组织贴壁法来分离脐带间充质干细胞，可是每次只能有部分组织块周围爬出细胞，大概有一小半的组织块周围爬不出来细胞，结果第一次传代只能勉强传一个T25的小瓶，得到的细胞好少啊，不知道大家是什么情况？爬出细胞少是什么原因啊？期待解答，小妹感激不尽！

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8 N$ y7 h6 p7 \  @5 }3 L1 p
P1代能有T25也可以了啊 再传P2代时 基本能传几个T75了啊 ( K$ k# F0 b  h$ ~2 [
  要是觉得细胞不够的话就多用几个瓶子贴壁啊 贴壁的组织块尽量剪小些 铺的时候不要铺得太稀但也不能太密了 一般一个T75贴170个组织块

iytbxxg

情况都是差不多，都是只有其中一小部分组织块爬出细胞，至于什么原因，个人认为应该大部分组织块都有细胞爬出来的，只是由于细胞之间的相互作用使得细胞聚到一块去了，这样可能更有利细胞生长吧，只是个人看法还望指教。其实你不必哪么快传代，等细胞长到你想得到的量再传代就可以了呀，只要有空间细胞还是可以增殖的。

沙漠狐o0

1.你确定你的组织块是来自华尔氏通胶不？
3 k/ T0 F# E7 ^" {  _8 m9 L" V2.你的组织块剪得够小不？: K3 |; R2 [  z; a3 v# n; Z
3.一般按照0.5g/T75接种，一般情况下于第5、8天换液，10天左右可以传代。; H- d! c& |8 T  k9 q: H) Y
15cm脐带，P1最少都可以传5个T175了。。。

2420527

换换培养基

chimo100

第一，要尽量收取华通氏胶，第二，要把组织剪的足够的碎，基本上可以传3个T75的瓶子，第4天换一半的液体，第8天全部换液，第10天-12天可以收获原代细胞进行传代培养。第三，再不行，你就要考虑你的培养基和血清的问题了。

小步

15cm是脐带我们传了20瓶T75的，剪的组织块尽量小，平铺分散均匀。

yuanshenyewu

可以在瓶底铺纤连蛋白试试，或凝胶

孙帅帅

原代换两次液，细胞团较多，细胞较密集的时候才选择重铺~~   重铺t75瓶后等细胞长到80%的时候再传代！如果没有长到80%那就换液就好了~

deshenglll

回复 xingyuncao 的帖子$ r9 K. p9 F5 G9 {$ O

. u1 u. ]2 D9 }7 ?" c' l$ S' `技术问题啊。15cm的脐带能培养好多了，怎么会细胞少呢。多做几次，摸索摸索经验吧。