肿瘤干细胞消化和流式检测如何保持细胞活性

冷释

回复 412159616 的帖子7 C. y* r" S" ^4 ^# O# X+ W3 r
; P' F+ _8 I" g1 u1 v  H+ }3 c/ M
从图上看，细胞状态可能不是很好的。我的经验是，悬浮球细胞养着培养基就是会杂质。一要注意保证生长因子的量，否则容易贴壁，细胞也容易衰老；二. 2-3天可以只加培养基进去，细胞生长状态好了换液传代。

asterwang

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/ X1 L5 b* L5 Z6 M# R2 ^3 i) k7 O% H( O( _. O* O8 }# b; }* i! N
受教了

974715506

不错

maiweiqian

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' P+ v9 {$ S# i! s6 W% s4 M
1 C. M8 [! U/ W$ f3 ]3 U      冷释用accutase的用量是多少呢？大约是多少细胞加多少的分离液？我也买了这个酶，不过还没有到货，用量怎么把握我心里还没有底。求指导。: W5 m8 P; s" g4 y% T
      另外，你的细胞球消化成单细胞传代之后能否再聚集成球呢？我之前消化的貌似已经不行了。

涅炎

回复 412159616 的帖子* P- @8 c: b/ \5 ?
! g) I, E4 d& _3 b7 g2 Q! z0 n6 V
感觉你的细胞状态很不好，黑的应该都死了，建议离心后再重悬。* z- b8 m0 o- D; S# Q
成球的细胞应该是不用消化就可以成单细胞悬液的，为了减少吹打导致的细胞死亡，可以少量用一点胰酶，但量要摸索。
1 j$ Z* C( ]6 O4 f) d7 d" t& K你的细胞状态为什么不好，看不出来，哪个大神看出来指导下。9 I, \4 m0 `0 q3 `) ]2 X& _+ N6 c$ ~
我做的乳腺癌细胞成球，请大家看看。
: O, Y1 E. U; o6 ?( S[attachimg]59358[/attachimg]
. g4 `# {; G; W7 H" j手机拍的，见笑了。

yueliangredehuo

回复 maiweiqian 的帖子. L# A) T( ?6 D- }1 J# D/ H& P

. D0 ~3 K  ^6 }4 J! l' ]+ y( W你好，请问你用accutase消化了吗？效果怎么样。我也才刚开始悬浮培养，不知道如何消化，加多少accetase消化

细胞海洋

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  H6 C6 k$ \* s7 I1 t0 q5 M
/ D2 l+ P! B, Q$ N' g  R1 w" O建议你发新帖提问

yueliangredehuo

回复 细胞海洋 的帖子4 v9 {( i% f* T" {

$ ]1 o0 f9 C" O4 \- e# c8 i行，没问题

nyming2008

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7 _5 f0 m, o$ {+ q0 _1 S. P, o5 R* q( ]( _( \& H: }% i
请问你的细胞多长时间能传代？