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楼主: xiangbalao
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CIK细胞培养疑问   [复制链接]

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11楼
发表于 2013-9-18 18:11 |只看该作者
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单个核细胞提取的量是多少、你接种的密度是多少、细胞因子加的量及先后顺序都有可能有影响
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12楼
发表于 2013-9-18 22:23 |只看该作者
回复 沙漠狐o0 的帖子
( ~# |- z+ U( T4 b9 C  p: i6 n  g: I. W: c/ D# A2 f6 W1 Q7 g5 v! L
因子浓度没错

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13楼
发表于 2013-9-19 08:13 |只看该作者
回复 xiangbalao 的帖子
7 I/ P5 a: Y+ z4 H4 J; F4 b  Z  @1 i
从以下几个方面考虑:1、标本来源2、培养液3、因子、抗体4、分离发放5、污染问题。把抗体好好检查检查。
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14楼
发表于 2013-9-22 14:26 |只看该作者
我有师弟遇到和你类似的情况。他就是获得的单个核细胞太少,然后铺的太稀,细胞就一直长不起来。
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15楼
发表于 2013-9-23 13:17 |只看该作者
回复 CELL007 的帖子: z6 O' m; I1 ]4 w5 S

3 h& B/ K% }6 B' Q, v收集的细胞也不少,种植密度也不稀

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16楼
发表于 2013-9-23 14:35 |只看该作者
想问下你是这一份细胞出现这种情况还是你做的所有CIK细胞都出现这种情况,如果你别的细胞培养的都很好,再找找问题所在就比较容易了,如果所有细胞都如此,换培养方法吧,绝对培养方式有问题。前面很多朋友都提到了原因所在,多想想。健康人的外周血来源或脐血来源的PBMC诱导扩增还是比较容易的,还有现在很多实验室都用配制好的完全培养基,自己配制的也没问题,就是耗时又耗精力还容易出问题。可以说说你的大概培养过程吗
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17楼
发表于 2013-9-24 14:14 |只看该作者
是不是单个核细胞分离效果不好的结果啊
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18楼
发表于 2013-9-24 16:09 |只看该作者
回复 xiangbalao 的帖子, d/ h! S. i6 {" t( q) }: \. w
# d% _' B& P; i. B5 l( l
我觉得应该是因子问题,当然,你要先确定你提取出的贴壁细胞是单个核才行
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