骨髓间充质干细胞培养

绝对忠橙

前辈们好，我想请教两个问题：7 O! t. }+ z3 E
    1.在培养BMSC的时候培养基成分及比例，最好能有各种成分的全称以及公司名称。
1 y6 r1 \3 U7 K5 p    2.大鼠小鼠能用相同的培养基吗？0 E! c1 k3 x0 B
    3.同一种细胞如果放在不同培养基能有多大差别？" `* A& @7 K( ~6 }  ~
谢谢大家！

iloveseven

做过小鼠BMSC的原代培养及传代，用的培养基是DF12+10%FBS。可以贴壁。

绝对忠橙

回复 iloveseven 的帖子& s. ?! ^* W) k0 Q4 Y7 Y

! l  V4 B3 F+ L" L- i% t谢谢，FBS有没有具体要求？我看分类好多

ytumuyangren

Gibco的a-MEM(不含核糖)，这种培养基可以培养大小鼠的间充质细胞。如果不添加因子的话，可以培养至P5代。Excell有一种无血清的培养基，据说这种培养基可以培养大小鼠的间充质干细胞至P7-P8代，我们实验室有人再用，只不过好像费用偏高。楼主经费充足的话可以试试。

gzeb

培养基的话，选择面还是比较广的，F12、DMEM都行，无血清培养基固然好，可是很贵的，好几千一瓶500ml，血清最好选进口的吧,不同培养基里面成分的不同，对不同细胞肯定会有一定影响的，细胞长势也不同，就如1喽说的，常规点的就F12+10%FBS,细胞长的还是可以的

zsc78

我用的是Gibco的DMEM/F12和10%FBS，FBS也是Gibco的。

wen373

1.培养BMSC：F12的好点，里面加10%胎牛血清和1%的双抗，培养基hyclon，gibco都可以。
5 B3 o6 V% ]" @: @; D    2.大鼠小鼠能用相同的培养基
* W* E) y8 B# x5 F( b( W5 A    3.不知你说的不同培养基是指品牌不一样，还是配制比例不一样的培养基，不同牌子，培养效果有差的，但是不大，gibco会好点。

东门吹水

我现在也养这个细胞，用的是普通的α-MEM培养基，再加10﹪的MSC FBS和双抗。细胞也长的挺好的。

mjc588

1.LZ如果经费充足，建议LZ用gibco L-DMEM/DMEM-F12加10% gibco FBS，大公司，每批次产品性质稳定，能很好的控制实验中细胞的状态。
; @* e( y! {" r& Y! f2.如果经费欠缺，可以买gibco L-DMEM/DMEM-F12干粉，自己配培养液，加双抗（青链霉素），HEPES，碳酸氢钠，好处是可以自己控制培养液PH值，不至于培养液放置时间过长而出现PH值改变，从而影响细胞状态，FBS还是建议用gibco的。
. I' C6 a( G: P5 s* l. j3.如果实在没钱，LZ可以用hyclon的培养液，也是L-DMED或者DMEM-F12，血清用TBD，但是提醒LZ，这样做实验可能因为细胞而不太顺利。
( G0 K$ s, P. W% A6 z补充一点，不管是大鼠还是小鼠，都可以养，但最好是提取幼鼠的bone，细胞活性好。

mjc588

再补充一下，我自己用第3种方法做过，细胞最多养到P3就老化严重，最后一次更是因为原代没养起来，最后换到第二种方法
# [3 ?9 D2 }: V4 c针对LZ第3个问题，我觉得，细胞在培养过程中最好不要更换不同类型的培养液，对实验的稳定性肯定有影响。