肿瘤细胞培养

zhouyuchuan1990

最近养的7901长得很慢，怀疑是支原体感染，我们自己配制了环丙沙星液，对实验室进行消毒，但细胞还是长的慢，是啥原因啊？咋处理啊？还有就是每次复苏细胞总是有很多死细胞，因为是肿瘤细胞，复苏也没有离心，直接加的含血清培养液，是什么原因造成如此多的死细胞啊？

embryonic12

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* g# {7 `% R. o! O2 S: F2 k& o7 `0 p8 x6 L2 w3 ^/ c3 G: p7 i
即便是肿瘤细胞，复苏也要离心，而后在家培养液，要不然dmso对细胞的毒性太大了，死的自然多。估计你长的慢也与这个有关。7 ^6 Z0 w/ \" F

漫步云端0511

复苏细胞时，要快速融化，冻存液中DMSO在常温下对细胞有一定毒性，而且死细胞对细胞的生长也有一定的影响，最好离心，去除死细胞和DMSO。

sunny.yc

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+ c% f7 Q1 ]( D! U. z, D
9 h/ f8 |6 ~/ B你自己都提到了“复苏也没有离心，直接加的含血清培养液”，自己可以先从这个疑点上改变一下看看哪

淡定的摩羯

如果是细胞本身支原体污染   你只做实验室消毒与杀菌是不够的    考虑用去支原体试剂对细胞进行处理    & I3 `/ u( k2 @) x/ E1 p# w
细胞复苏最好是离心的    如果你不那么做即使肉眼观察细胞的生长速度没影响 那么状态肯定是会受到影响的  影响后续试验

xinquan15

细胞复苏时，可以先不离心，但需要培养基加入的量把DMSO稀释到1％以下，过夜后换液，细胞生长良好。- C, Q3 l6 p, i2 }- E6 I% Y# g
另外支原体污染很麻烦，可以日常卫生时加入空气预防，培养箱预防，还有水浴锅预防的试剂，并且每月抽查支原体感染。