脐带干细胞分离后

Amanda121201

我将脐带的华通质胶分离剪碎培养5天后，没有贴壁呀 换液的时候很不方便，而且在边缘也并没有发现有细胞的出现，求指教

iytbxxg

组织块培养教育5天没有看到细胞贴壁很正常，这个时候一般只能在个别组织块旁边看到零星几个细胞贴壁，考虑到个体的差异性，没有看到细胞贴壁也是正常的。至于换液，把培养液和组织块都倒到离心管中，离心一下再把上清去了，换上新的培养液就可以了。

荷荷

华通胶分离剪碎后最好多洗几次，去除透明质酸；我用的一次性的瓶子，贴壁还好，换液的时候也可以把胶块再洗两次；另外根据所用培养液的不同，细胞爬出时间也不一样，一般在6-10天会有爬出，楼主再等等看，是不是还没开始爬。望楼主好运！

无限增殖

开始的时候少加液，隔夜补次液，贴壁会很快.细胞长出来一般要一周时间，我遇到最晚的有半个月，耐心等待...

Amanda121201

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2 _, |7 r: T+ M
* ?% r( e6 m+ a6 E/ D* @因为没有贴壁 然后肉眼又没办法判断是否有细胞爬出，所以我就将培养品倾斜了下 把上清给吸出来一部分 后又添加了部分培养基 多谢啦 我再观察几天

Amanda121201

回复 荷荷 的帖子# ?) v& p  S7 N
7 }& Y7 E. @0 G* h( k5 }* Q
我洗了两次 不过后续就没有洗过了 刚半换液了 我再观察下 多谢建议

Amanda121201

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( [( y' A# d- r  i' C: J) p- d9 Y
培养基太多 浮力大所以不容易贴壁是吧 我是75的培养瓶 加了十毫升多一点儿的培养基 不算多吧

deshenglll

回复 Amanda121201 的帖子5 G# t8 C! X/ g. |* R. a

4 V! D6 `8 E* W; K看你的了。一般情况下脐带组织贴壁法是3到5天内能发现有贴壁的细胞。自己慢慢琢磨吧。

无限增殖

回复 Amanda121201 的帖子, ]/ w9 f8 ]; |

* p! M- K& o9 f) b5 W太多了，先加4ml，隔天补液...

荷荷

回复 Amanda121201 的帖子" i  F; ]0 T6 `. u, u: I

9 s5 {( ]. R0 w$ M. u' [T75的瓶子，初始贴壁时培养液加组织块的总体积最好不超过5ml；换液时如果不换瓶子的话，培养液还可以再少个0.5ml左右