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是不是细胞污染 [复制链接]

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包包
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楼主
发表于 2014-1-15 00:43 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
最近在培养脐带间充质干细胞,用人血清培养,培养第五天,组织块成团,显微观察有细胞碎片黑点比较多,细胞培养基成粘稠状,果冻状,一摇又成正常液体,细胞培养基澄清透亮,无浑浊,有细胞长出.请问是什么问题?
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沙发
发表于 2014-1-15 10:13 |只看该作者
不知道,你人血清是否灭活过。未灭活血浆具有丰富的纤维蛋白,在培养后会使培养基成凝胶状。解决办法65℃灭活半小时,离心去沉淀,或者在培养时加肝素钠抗凝。
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金话筒 优秀会员

藤椅
发表于 2014-1-16 15:13 |只看该作者
人血清要是没经过处理的话确实会有凝结,果冻状的;你做一下无菌检测试试吧;
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板凳
发表于 2014-1-17 16:34 |只看该作者
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血清灭活应该是在56℃水浴中灭活半小时吧!建议你做一组平板!
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报纸
发表于 2014-1-21 16:56 |只看该作者
……说的好神啊,上个图来看看嘛

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地板
发表于 2014-1-22 15:17 |只看该作者
根据您的描述,你使用的是组织块悬浮法培养的脐带间充质干细胞,培养过程中,注意培养基的颜色,我们在培养时每三天添加新鲜培养基,以维持营养,通常在6-9天就可以去除组织块了。在培养过程中,培养基会变得粘稠。对了 我们培养脐带间充质干细胞使用的是无血清培养基。
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金话筒 优秀会员

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发表于 2014-1-27 16:29 |只看该作者
本帖最后由 wf78365421 于 2014-1-27 16:32 编辑 & A, w  E# a0 q( H- S
+ e' S) \; b- K7 y2 h
1、你用的是组织块贴壁法培养的脐带间充质干细胞,0 U, [9 _" Y7 B& O1 X* g
2、一般前3-5天,间充质干细胞很少,随时间推移,逐渐出现,最后呈集落。
  B# J( S( A' W/ g! l' t" {& U3、培养过程中需要根据培养基的颜色,每隔三天添加新鲜培养基,通常在7-14天就可以去除组织块了。" M# d3 k) P3 L5 ?( U/ _
4、至于组织块呈果冻状,粘稠等等,都不用管,是正常的。在培养过程中,培养基会变得粘稠。
9 @: a2 k  o& K; p7 F& u
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