新分离的淋巴细胞里含有大量的红细胞，各位都怎么处理的？ - 免疫细胞治疗专区干细胞之家



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lwr002

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楼主

发表于 2014-2-11 20:06 |只看该作者 |倒序浏览 |打印

新分离的淋巴细胞里含有大量的红细胞，培养48小时后细胞并没有怎么增长，各位都怎么处理的？

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沙发

发表于 2014-2-12 09:25 |只看该作者

试过用红细胞裂解液吗？一般的红细胞不需要处理，过些日子就是自然裂解掉的

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ccst4838318

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藤椅

发表于 2014-2-12 09:30 |只看该作者

在种瓶前1800转清洗2-3变，红细胞就去的差不多了，种瓶后红细胞对培养细胞的影响不会太大不用在意，基本上培养几天红细胞自己就破裂死了，而且你才培养48小时，本身时间就很短，观察不到增殖很正常，细胞还处于适应期。

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a52602589

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板凳

发表于 2014-2-12 09:41 |只看该作者

直接培养基裂解~~没增长是没加白介么

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jianglei_sd

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报纸

发表于 2014-2-12 11:28 |只看该作者

不用处理，再等等，48小时时间太短了，到d4,96h就能看出增殖了

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jojo1988509

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地板

发表于 2014-2-12 11:30 |只看该作者

你用淋巴细胞分离液后，吸的时候尽量注意啊，宁可少吸一点也不要吸到红细胞。照理说你如果很小心的话根本不会有太多的红细胞的，还有，新分离的人淋巴细胞一定要加PHA去刺激增殖的，你是不是没有加啊？正常的话两天后应该还是会有增殖的，除非你那个淋巴细胞来源于身体很差的人就不一定了。

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xu_shufen

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7楼

发表于 2014-2-14 07:52 |只看该作者

做CIK时，有的病人分离的外周血单核细胞混有红细胞，有时还很多，可能是由于个体差异红细胞的比重不同，处理的方法是，用红细胞裂解液裂解红细胞，但要注意时间防止淋巴细胞过度损伤，具体的条件要摸索一下。另外如混有少量的红细胞就不需要处理，一方面少量的红细胞对细胞的增殖没有影响，随着培养时间的延长，红细胞会死去。另一方面有报到还有处进作用，具体原因不详。