求助脐带间充质干细胞最基本的鉴定标准是什么呢？

龟酱

楼主第一次接触间充质干细胞，谢谢各位大虾。。

lidd14

4 L1 L+ H( K( _& d  U6 D6 G3 k4 I) z3 X  l
细胞表面抗原CD29、CD44、CD73、CD90、CD166阳性表达，CD34、CD45、CD31阴型表达，细胞贴壁生长，形状类似成纤维细胞。能成骨，软骨、成脂分化

viv

$ Q" b  W  j4 P8 s  B' l
7 w5 |, E! l/ w& g3 N) o% @5 JISCT Minimal criteria for defining MSC (Cytotherapy (2006) Vol. 8, No. 4, 315-317 ):* ], F- k: _; t3 ]- ]
1.  Adherence to plastic
! W. z* b! o. T# `2.  Specific surface antigen(Ag) expression  
% s8 W6 M+ L; ^, I  j6 |3.  Multipotent differentiation potential
$ I) b% {% E% l. k) j/ ]6 y. E7 b+ h+ W5 ~
鉴定方法：1 A6 S: ~  y/ t9 ~$ r/ F
1、生物学特性：倒置显微镜下直接观察，培养瓶中的贴壁细胞为成纤维样，漩涡状生长
; P  p& n8 t+ L) q2、表面标记物（流式表面抗体）：阳性如CD29 CD44 CD73 CD90 CD105（不低于95%），阴性如：CD14、 CD34、CD45、CD31和HLA-DR阴性（阳性率不高于2%） ( x7 q! ?4 G) X% `2 d
3、诱导分化：间充质干细胞成脂肪诱导分化、成骨诱导分化、成软骨诱导分化
5 g$ Y: M8 W7 G$ \4、成克隆性，把细胞充分稀释，然后放到培养皿里养，过几天形成克隆。
* g6 ?. B' M7 X6 x5 w& G; a' }1 D) {
具体步骤参见：
) o0 Z" j2 |: x) k" shttp://www.doc88.com/p-674409873150.html, v* Z# S5 z' ]. G
http://wenku.baidu.com/link?url=VDd5_2Xt7MZOHO0MU_igPLLq4UuvCM2o4ar7M7UV54iSZ10c_kPKEZjTO_3lnfoXjY28-_gN3BF27d5-8GyOvSrPOY7J7N30RqfIVPfC5Iy

龟酱

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, ~) c/ I% O/ v谢谢前辈指点~

龟酱

回复 viv 的帖子# T6 }# }4 \+ g! O6 i5 }5 P

7 I: V# j5 ^6 \! @2 i0 Q1 L* \感谢前辈提供的信息~

孙帅帅

1、表观形态学鉴定：一般认为体外培养的MSC细胞体积小、呈锁形、核浆比大。
8 u4 a: X( `+ b2、流式细胞仪鉴定：不表达分化相关的细胞标志，如Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ形胶原，也不表达造血干细胞系的表面标志，如脂多糖受体CD14、CD34以及白细胞表面抗  原CD45等，但是表达CD29、CD44、CD73、CD90、CD105和多种表面蛋白。
) d! G/ \7 Z" u# Q3、功能学鉴定：MSC连续传代培养和冷冻保存后仍具有多向分化潜能，而且保持正常的核型和端粒酶活性，但并不能自发分化，在体外特定的诱导条件下，MSC可分化为骨、软骨、脂肪等多种细胞。

龟酱

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2 I2 x6 o. k1 p5 {! h$ d% M# b" @0 l, O
感谢前辈解答！

月_幻影

① 细胞形态检测
( ^& K( [9 s' q- A. `+ P  倒置显微镜下直接观察，培养瓶中的贴壁细胞为成纤维样，漩涡状生长。
; l' z7 Z, ~9 ^/ I2 ~7 j# I9 G② 表面标记表型分析" e3 E: A! h# M( I  W
  CD29、CD44、CD73、CD90和CD105阳性，阳性率不低于95％；
0 u/ |; b1 }: X2 F( m4 Z  CD34、CD45、CD31和HLA-DR阴性，阳性率不高于2％。: Q7 h3 l1 K6 O! }# m5 d
③ 多向分化特性：在诱导培养条件下，细胞应能向脂肪、成骨分化。; r' f  W0 n5 C$ f* S, Z
% r4 q* [1 Z$ Y. I$ H" s# d

龟酱

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- V! x& ?4 N+ W2 v
% L5 [( u( v- r% ]感谢前辈解答~

半夏正微凉

请教下 阳性率不低于95%的阳性是怎么画门的啊