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楼主: 大海之家
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包被方法诱导NK细胞的可能性!!! [复制链接]

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发表于 2014-4-1 09:33 |只看该作者
回复 zhenhuale 的帖子& C  X# H' Q! s% f  o9 d5 Q8 S

8 Z: Y: @) C: A8 c' O4 w2 O请问你们NK细胞培养是使用NK细胞培养基还是淋巴细胞培养基的?是包被诱导还是悬浮诱导?
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发表于 2014-4-1 10:36 |只看该作者
回复 zhenhuale 的帖子
8 M' [! U0 z3 a- v; t
  `; D- }. A, k2 a4 V3 T  h% B50ml血扩增20亿个细胞单细胞量确实不怎么多,但是你的纯度可真是高啊,是CD3-/CD16+/CD56+细胞达90%,还是只是CD3-/CD56+细胞达到90%呢?想问下你这个这么高的纯度是怎么做到的?还有就是你的细胞因子是不是用的有点多呢,我们只用三种细胞因子细胞量就能达到60个细胞,但是纯度相对很低,CD3-/CD16+/CD56+只有30%,培养瓶没有包被。9 ^3 ?1 ?, G* f; V) E1 {
再问下,你用的是什么NK细胞专用培养基?! \& n, a$ ]9 q: }- d2 g/ R! V
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发表于 2014-4-1 10:57 |只看该作者
回复 zhenhuale 的帖子7 _; k( I" K) F  R6 b0 e+ T; X* q' n
0 o, u# ]2 O( M5 k4 L
50ml细胞量扩增20亿个细胞,就细胞量上来说不是太多,但是90%的纯度确实很高,你是怎么做到的,免疫磁珠分选了吗?我用50ml血可以扩增细胞量达到60亿个左右,但是纯度很低,CD3-/CD16+/CD56+细胞只有30%,对于你的90%我很好奇?还有就是你说你用的专门的NK细胞培养基,请问是什么培养基?
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发表于 2014-4-1 11:03 |只看该作者
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回复 weijunning 的帖子
9 n* h* O+ i- V0 W* f. F* R- x. v: h1 W$ ?: O/ j) i
什么培养基,有没有跟其他的淋巴细胞培养基做下对比,到底有多大的提升空间?我们做的没有进行培养基包被,因为是做临床治疗的,为了安全起见,虽然细胞量还可以,但是纯度较低,因此我非常想知道包被之后的NK细胞量和纯度上,在同样的培养体系下,和未包被的到底有多大的差别?所以想问问你,能不能给个具体的数据支持呢?
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发表于 2014-7-2 02:11 |只看该作者
包被的方法挺实用的,可以选择包被,血清用自体的,一般1%,看细胞状态适量调整。培养基干细胞的就行。
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发表于 2014-8-19 17:14 |只看该作者
回复 weijunning 的帖子; x; |/ Y) i2 \6 {% l6 p1 Z
% a# ?0 L8 r# M* G4 n& F
把因子直接包被到培养瓶上吗,如何包被呢

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发表于 2014-8-19 17:15 |只看该作者
回复 大海之家 的帖子6 F; \$ G2 @7 t1 V( y* x8 K/ [9 h
. x, C( v. r* p, V5 v( V, g" U6 f  [
文献上有将这些因子通过转基因的方法表达与滋养细胞表面,然后与单个核共培养
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发表于 2014-8-19 17:16 |只看该作者
回复 zhenhuale 的帖子' @. A; i/ e( O2 t, y) O" t" E

/ n  ^! m% E0 T5 U' C你好能分享一下NK 的培养流程吗

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发表于 2014-8-19 17:17 |只看该作者
回复 weijunning 的帖子
6 R* L- C/ x, J
0 H! V! @5 h/ r8 F4 `! v+ o普通的培养基就可以了
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发表于 2014-8-26 13:18 |只看该作者
今天看到一个专利上写用CD3和CD52包被,再用IL2刺激。仅供参考
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