包被方法诱导NK细胞的可能性！！！

大海之家

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请问你们NK细胞培养是使用NK细胞培养基还是淋巴细胞培养基的？是包被诱导还是悬浮诱导？

ccst4838318

回复 zhenhuale 的帖子6 N  t" @4 x3 r6 p

3 T, z$ d' D& G$ n$ O4 r0 W# w# `50ml血扩增20亿个细胞单细胞量确实不怎么多，但是你的纯度可真是高啊，是CD3-/CD16+/CD56+细胞达90%，还是只是CD3-/CD56+细胞达到90%呢？想问下你这个这么高的纯度是怎么做到的？还有就是你的细胞因子是不是用的有点多呢，我们只用三种细胞因子细胞量就能达到60个细胞，但是纯度相对很低，CD3-/CD16+/CD56+只有30%，培养瓶没有包被。. ?5 F" s+ w9 [+ L* n
再问下，你用的是什么NK细胞专用培养基？
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ccst4838318

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50ml细胞量扩增20亿个细胞，就细胞量上来说不是太多，但是90%的纯度确实很高，你是怎么做到的，免疫磁珠分选了吗？我用50ml血可以扩增细胞量达到60亿个左右，但是纯度很低，CD3-/CD16+/CD56+细胞只有30%，对于你的90%我很好奇？还有就是你说你用的专门的NK细胞培养基，请问是什么培养基?

ccst4838318

回复 weijunning 的帖子5 ]- d0 A" u! U4 I# H/ ^
6 \$ d. r0 H9 ]" [
什么培养基，有没有跟其他的淋巴细胞培养基做下对比，到底有多大的提升空间？我们做的没有进行培养基包被，因为是做临床治疗的，为了安全起见，虽然细胞量还可以，但是纯度较低，因此我非常想知道包被之后的NK细胞量和纯度上，在同样的培养体系下，和未包被的到底有多大的差别？所以想问问你，能不能给个具体的数据支持呢？

gondobar

包被的方法挺实用的，可以选择包被，血清用自体的，一般1%，看细胞状态适量调整。培养基干细胞的就行。

yanglixia1984

回复 weijunning 的帖子7 G- M' G* a& t
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把因子直接包被到培养瓶上吗，如何包被呢

yanglixia1984

回复 大海之家 的帖子5 g5 K4 p( W: _' L! W
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文献上有将这些因子通过转基因的方法表达与滋养细胞表面，然后与单个核共培养

yanglixia1984

回复 zhenhuale 的帖子- l5 |# w# Q, B; Z% d$ \# f

% m6 E% h( Q4 c$ O( {你好能分享一下NK 的培养流程吗

yanglixia1984

回复 weijunning 的帖子
5 L/ G& d4 J/ f1 T: C! T/ w5 I  T, M8 u3 F
普通的培养基就可以了

sonsyoran

今天看到一个专利上写用CD3和CD52包被，再用IL2刺激。仅供参考