构建的载体不表达 - ips专区干细胞之家 - 中国干细胞行业门户第一站

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楼主

发表于 2014-3-12 16:38 |只看该作者 |倒序浏览 |打印

我构建的的载体是目的基因+2A+GFP，转染经过抗生素筛选过后，细胞都发绿色荧光，但是我的目的基因没有表达，我的GFP前面有ATG起始密码子，不知道哪位知道是什么原因？

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沙发

发表于 2014-3-13 10:25 |只看该作者

你的目的基因片段在连接到载体之前是否测序确定序列正确无误，如果基因在扩增过程中突变尤其是移码突变，目的基因就不表达。

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优秀会员

藤椅

发表于 2014-3-18 11:33 |只看该作者

你基因在目的细胞表达高不高，这是第一；目的基因翻译元件及编码框对不对以及与2a有无连接子，这是第二；另你说清楚过程

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