脐带间充质剥离

yanwu_1

问题不大。传代后流式检测，可以达到正常值，95%以上。

月_幻影

不剥外皮也可以的，不会有很大的影响，只不过会出现一些杂细胞。。。不过我们这边做的时候都是将血管去掉后直接夹着羊膜从上面往下撕华通胶，不用专门除去，其实也不麻烦的。。。

无情95至尊

我们实验脐带最外层羊膜上皮细胞必须剥掉的！我看过有的论文里没有剥掉，加了某种细胞因子之类的抑制它生长什么的。剥脐带是很繁琐的剥一根要个把小时，不过剥过几次后就能掌握技巧，我直接先剥表皮，像剥龙虾尾部一样。我觉得最难的是静脉血管了容易破，还得剥干净不然影响细胞培养！大家讨论讨论心得呗

weijunning

回复 henryjia 的帖子" }! k  p$ E$ }# v7 R  o0 J
0 X: w4 s" r5 D
我们的实验证明：不用剥离外皮也能得到很纯的脐带MSC。有流式结果大力支持。

henryjia

回复 weijunning 的帖子
' \3 e1 v  T8 t! k6 ?: U  F5 u4 {5 p3 B9 ~; I; o
不要被流式细胞检测结果迷惑，那只是表面抗原，并不具有特异性。要证明是MSC，多分化潜能试验必不可少。需要做成指，成骨，软骨测试。

weijunning

回复 henryjia 的帖子
) l! i2 d( \( o4 P2 \0 D9 U3 O9 Z7 [, f. [0 A) W) `
f非常感谢你的建议！我们也正在做分化鉴定，起码流式检测结果事先给我了做下去的信心。

lql2006wh0

回复 星空雾雨 的帖子6 b2 h+ _3 g" c" f; c2 d  M
1 [' o$ }) `  W6 S7 ?$ H
流式的话要至少达到95%，两篇文章，可以看下，时间太长不记得了，我这好像也没全文，只有摘要。1 R" q; x5 K6 `/ Y$ X
①Cytotherapy. 2005;7(5):393-5.
: x. m: T/ @9 f" V: HClarification of the nomenclature for MSC: The International Society for Cellular Therapy position statement.
/ G* E. W4 c' N! E②Cytotherapy. 2006;8(4):315-7.5 f) w, v4 r. \' L% w) t: H# t
Minimal criteria for defining multipotent mesenchymal stromal cells. The International Society for Cellular Therapy position statement.

星空雾雨

回复 lql2006wh0 的帖子" U" S) ?) n, f9 F% ?! l5 P

6 w! q' B* r, z$ K* Q) e; z( K哪个细胞达到95%

星空雾雨

回复 henryjia 的帖子% I4 ]! P2 X, R

% ?; }- v) W1 Q" b# j+ |分化的话时间太久  怎么才能更快的检测出来是不是MSC，还有脐带不剥外层皮有没有影响

lic126

起码我们是不剥表皮的。。。传到P1后流式结果已经能达到95%以上。。。并且部分标本在P4也做过相关的成骨成脂的分化检测，结果也相当不错。。。所以我们的实际操作经验是不用剥离表皮。就剔除了动静脉。