关于胚胎干细胞消化用accutase的中止消化问题

susan901017

回复 bubble_w 的帖子
* x- H& z  n) w/ P% i- j& x6 k! P* v7 R
吹打后是单细胞，偶尔会有小的团块

shaozi402

回复 bubble_w 的帖子: W7 q$ f) R8 l  K

9 p3 |4 t, y5 n$ K4 d  ]大都是单个细胞了。

kasaya

Accutase消化细胞根据细胞类型一般是2-5min，第一次如果不确定的话，可以隔一分钟看看细胞分离的情况，一般看见被消化的小细胞团块飘在培养基中就可以通过稀释accutase终止消化了，使用DMEM就可以，然后轻轻地将细胞吹打成单细胞。Accutase虽然很有效率但是对细胞损伤较小，所以可以等细胞被消化成小团再进行吹打，因为为了成为单细胞用力吹打的机械损伤很可能比酶的损伤还大。

watchen198891

回复 shaozi402 的帖子
* y4 ^3 `) N' \2 h6 Q/ q7 R
) h& u& X' M, y我想请教个问题，这个酶的使用浓度是多大？

shaozi402

回复 watchen198891 的帖子: {) z1 T2 H3 w/ j0 o3 M
4 U0 J+ b* d  A4 O% }
用原液消化

watchen198891

回复 shaozi402 的帖子
7 A  S2 o1 Y: J- B- e9 T
  Q- P. f/ o, I+ _$ Q: b好的，谢谢，我已经试过了，现在细胞也长起来了。

yeungfan

加入等量DMEM/F12终止消化就可以

BSHT1994

回复 kasaya 的帖子/ V3 ~% u6 \. h7 L: k6 j6 Q* J

2 _7 w8 t$ }1 }( U& _你好，我想请教个问题，消化结束加入培养基稀释，就直接计数接种了吗？不需要离心吗

细胞海洋

回复 BSHT1994 的帖子
7 d( D; p8 x. K2 j
8 e) z) o) t0 A# A0 ^  g3 i- l/ }建议你发新帖提问

ghy529529

传代是消化成小的团块还是单细胞？