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CIK细胞贴壁了 [复制链接]

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楼主
发表于 2014-5-10 08:27 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
患者采血机采血,原血有135ml,浓度为48.7x106,回收率又49.5%,但是孵育两小时后,发现大多数细胞贴壁,而且细胞形状不规则,视野里细胞很暗,不圆亮,请问贴壁的是什么细胞?
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沙发
发表于 2014-5-10 08:29 |只看该作者
第四天准备补液,发现培养液颜色变化不是很大,还是偏红,测细胞数比培养的浓度还下降了,接瓶的时候是2x106,第四天1.6x106,不过细胞细胞圆亮了许多,贴壁的也可以吹下部分,但还是有许多贴壁

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藤椅
发表于 2014-5-10 08:32 |只看该作者
这种现象正常么?之前我们培养健康人外周血的,没有贴壁

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金话筒 优秀会员

板凳
发表于 2014-5-10 16:04 |只看该作者
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回复 3254938 的帖子5 C+ R2 J& Q4 h% L4 T) y: k

3 _) p- v2 l$ C; @0 X# r) {- y: \3 G+ ?首先问一下,你总共分离得到多少单个核细胞?用多少单个核细胞进行贴壁处理的?
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报纸
发表于 2014-5-10 23:31 |只看该作者
本帖最后由 FreeCell 于 2014-5-10 23:31 编辑
( J$ w& H4 W' Q0 D, c- s* Z' g) D. U, v
嘻嘻,看到题目很激动,还以为楼主发明了一种贴壁法培养CIK的新技术

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地板
发表于 2014-5-12 08:19 |只看该作者
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0 `# X  W# z. v+ H" S  [  `# Z+ `5 C. Y+ u/ x8 S
建议上图

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发表于 2014-5-12 11:53 |只看该作者
贴壁细胞是以DC细胞为主吧。并且采血机采的细胞不是很纯,处理的时候可能也没处理好,所以有很多其他细胞,在培养过程中会死亡,所以造成细胞数量减少,第四天的细胞应该是淋巴细胞,可以单独把第四天的细胞分离出来,继续培养,不然里面很多死细胞会对细胞生长不好
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发表于 2014-5-12 14:05 |只看该作者
细胞在培养2小时后贴壁是常见现象,很多做DC-CIK的试验,会利用这一特点将贴壁细胞向DC诱导,悬浮细胞向CIK诱导,第四天应该有一部分细胞还在贴壁状态,所以计数不是很准确,如果只培养CIK的话一般到第六天贴壁细胞多数会悬浮。
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发表于 2014-5-13 15:31 |只看该作者
回复 xinquan15 的帖子' J/ ?/ y' w! a9 p

& b0 g# e% K. ]' {! ^采血机出来的原血细胞量在65.7x108,回收后32.5x108,开始我们都以为不正常,回收率达到一半了,一天内我们做了三个患者,都有一半的回收率,才放心,刚接上去的时候,的确贴壁了许多,第三天取样计数,比接的时候细胞浓度低,此时还是许多贴壁的,第四天补了下液,浓度已经超过接种时候,第六天观察,贴壁细胞基本没有了。

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发表于 2014-5-13 15:32 |只看该作者
回复 3254938 的帖子
- [% u  s. E7 [' ^& o. I. p7 _# k3 `$ i6 D( p. |
赞同xinquan15的说法,现在已经恢复正常了,今天是第八天,已经去取样给第三方检测了,目前有5x109的细胞量,第十天准备第一次回输!
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