康宁的2ml冻存管大家最多加多少毫升细胞液？

伊诺强

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对的，但是一般都是人体来源的就没问题吧。

青云之上

1 mL-----1.5 mL，不易太多，1.8有点多了，接一皿多，两皿少，复苏温度42---37，尽量快，所以冻太多复苏时间也会随之加长。另外，康宁的冻存管会进液氮，拿的时候切记要快，拿出来要解冻的管记得一定横着平放，不要竖着放或拿在手里~~~~

aochongyu

回复 青云之上 的帖子! S4 j' x/ U' T% j; f

" D6 p- @+ I) ]8 E谢谢，我想再问一下，是横着在水浴锅里复苏还是就横着放一会让液氮流出？
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aochongyu

回复 伊诺强 的帖子6 k# Q! E+ R$ B4 R' ?( `8 e
5 S3 h+ }+ w( A# c
恩，是的

青云之上

回复 aochongyu 的帖子0 g0 Y3 y  G* V! o4 R
6 ~6 s9 `3 a! e! e, H
呵呵，在水浴锅里肯定是竖着了，进水不就污染了嘛，在从液氮罐拿出来到放进水浴锅这个过程平放，液氮基本也就挥发的差不多了~~~

细胞分裂

拧盖子不要刻意拧的很近，如果灌进液氮，很容易炸开，另外见外建议楼主买Nunc的，虽然贵了点，但是内旋的，安全性会提高很多，细胞一般都遵循慢冻快融的过程，都是因为怕冻存液对细胞有伤害，加细胞液的话，一般都是1或者1.5，这样方便计算些，当然也考虑到安全性。

aochongyu

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恩，谢谢，是的

thor0504

回复 月_幻影 的帖子2 ]' a* e% L4 O" Z9 a, B( }

( h8 A9 u: A7 W( M: ~5 z! R1 K1.8ml的冻存液在37℃水浴复苏的话1分钟一般不会全融的，请教下有什么诀窍吗？我们复苏时间没那么短。

牵着蜗牛去散步

一般最多加入1.8ml，冻存管最好选择内旋，防止液氮进去，复苏一般选用37摄氏度复苏。

fdgg012345

我一般用1-1.5买ml,内旋的（内旋的该盖子不易被冲掉吧），同一包corning的管子，里面总有几个管子盖子是坏的，用力拧会拧过头，这些管子我觉得还是不要用了吧。