CAR-T技术原理

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CAR-T细胞技术已经发展出3代，第1代CAR在胞内只有１个Ｔ细胞CD3ζ受体的信号区；在此基础上第2代增加了1个共刺激分子信号；第3代增加了2个共刺激分子信号。这些改进是基于一系列体
0 T5 ]7 G! G' B8 h外和体内的实验和临床探索。目前，用于临床治疗研究的主要为第2代CART细胞技术，其中用来携带CAR的载体主要来源于逆转录病毒和慢病毒

wang255425

目前已经在开发的第四代CAR-T技术，包括整合表达免疫因子、整合共刺激因子配体等。

ET生物人

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/ V, @# o2 T: E/ T( `0 y: A; l/ x: ?西方国家的公司目前是应用于临床研究，国内的医院和公司也有啊

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CAR-T治疗--肿瘤靶向免疫治疗
6 i  r9 g& I" p0 P! K. y" Y0 ^• CAR-T，全称 Chimeric Antigen Receptor T-Cell Immunotherapy，即嵌合抗原受体T细胞免疫疗法。5 H; q4 W6 ~% b
• 通过将识别肿瘤相关抗原的抗体片段scFv和CD3胞内信号域 ITAM在体外进行基因重组，生成重组质粒，再在体外
9 v" T& T/ [/ t7 u" z; z转染到患者的T细胞，使患者T细胞表达能结合肿瘤抗原的受体。转染后经过纯化和大规模扩增后的T细胞，也即
8 K9 `9 X/ w; X5 ]+ A2 ?CAR-T细胞。CAR-T技术利用病毒载体将 CAR稳定表达在T细胞中，经过活化扩增，进入体内后能选择性识别并杀死肿瘤细胞。
% i3 W2 {& @8 S• 可以特异性地识别肿瘤相关抗原，使效应T细胞的靶向性、杀伤活性和持久性较常规应用的免疫细胞大幅提高，并可克服肿瘤局部免疫抑
6 @) w9 j( u* W" [" e3 }( @制微环境，从而打破宿主免疫耐受状态，杀灭肿瘤细胞。2 B+ m: _$ L. l; W5 s( K6 C2 |% f
肿瘤相关抗原：tumor-associated antigen，TAA，是指一些肿瘤细胞表面糖蛋白或糖脂成分，它们在正常细胞上有微量表达，但在肿瘤细胞表达明显增高。
+ P, j/ e4 s9 G1 |3 P) E8 _3 l4 NITAM：immuno receptor tyrosine-based activation motifs,免疫受体酪氨酸基序活化信号域
7 y* `( h2 P9 z8 l. x7 l

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CAR-T重组质粒的构建; @5 z' Z/ o+ A7 i% Z
1. 选择载体：腺病毒、慢病毒或其它能高效转染T细胞、表达嵌合抗原受体的载体。
; M& P/ B% p3 M" ?4 h2. 选取靶点：即肿瘤细胞特异性或相关的膜表面蛋白，如B淋巴细胞的CD19。
/ I2 S9 V2 W+ ?- D3. 获取特异性好、亲和力强的抗体的基因序列：这是CAR-T技术的关键和难点所在，7 Y$ o0 a: ^5 u& k8 R+ t- ~
因为抗体的产生是免疫原作用下基因重排的表达产物，抗体基因编码序列在
3 b4 ?: f, w# Z) ~6 k' UNCBI的数据库是查不到的，而且在目前阶段是不可预测的。动物来源的抗体片  J% g( x# e) R, V& R
段在人体内可能会诱导针对此抗体片段的抗体，削弱长期的治疗效果，所以，往
2 \4 U& K' j' H4 f! I: N" ^往需要把动物来源的优质抗体人源化。
* V! @1 p& x1 B4. 构建重组质粒，感染T细胞：除抗体片段的编码基因，还要加入跨膜区、CD3胞7 C; l" i1 R# ~2 w8 I5 B9 R. Z
内区、共同刺激因子以及白介素的编码序列。也是关键技术。! q9 y$ Q9 @9 |5 @, C* `7 b$ L
5. 体外验证：嵌合抗原受体是否正确表达于T细胞表面；CAR-T细胞能否有效扩
' i4 t8 W+ M/ I- p; g! P, E) R& {增；CAR-T细胞是否能识别病人的肿瘤细胞并溶解肿瘤细胞；释放细胞因子的种9 c  W) g) U- V* N' r$ U5 ~( w
类和数量，等。
- |2 F) E1 Z) R5 @体内验证：输入人肿瘤动物模型，活体检测CAR-T对肿瘤的消除作用。

maoyy2011

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chb611301

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