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脐带间充质细胞培养有关纯度问题   [复制链接]

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包包
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楼主
发表于 2014-5-30 10:04 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
最近在做间充质细胞,脐带来源的,所得细胞纯度并不高啊,杂细胞很多,爬出细胞的时间也长,查文献有用酶消法的,细胞长出的速度是提高了,不知纯度会如何啊?大家一起探讨下吧
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沙发
发表于 2014-5-30 10:34 |只看该作者
酶消化法,应该比较纯的,如果不放心,就做流式检测下。
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藤椅
发表于 2014-5-30 14:04 |只看该作者
用酶消化法,把组织块过滤干净,最后做流式,不过通过形态和长得方式也判断差不多!
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板凳
发表于 2014-6-3 08:37 |只看该作者
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消化法得到的P0细胞相对比较杂。。。但通过条件培养基以及传代,基本到P1细胞就能得到比较纯的了。
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报纸
发表于 2014-6-3 10:19 |只看该作者
我用的组织块法,传代后纯度很高啊,流式鉴定阳性表面标志99%以上。
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地板
发表于 2014-6-3 14:57 |只看该作者
回复 huajie881026 的帖子& y% _/ q8 h% b: X
1 |' T$ x0 h. Z7 j1 V
有图片吗?我养的流式结果也很好,但是感觉形态有点偏分化状态,因为我以前养的皮肤成纤维细胞都很小的,长梭形,但是这个细胞有点大,伪足细长。不知道这样的状态是否属于正常。
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发表于 2014-6-3 16:14 |只看该作者
回复 luyue6453 的帖子! j' Q7 B# T6 R& n+ A+ H4 W
+ q7 V3 F  O/ B% g* d8 q( e& b1 [
我的也是,有点分化的感觉,还像有单核细胞似的
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发表于 2014-6-4 15:00 |只看该作者
检讨一下培养基和血清。
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发表于 2014-6-5 09:52 |只看该作者
回复 雁南飞 的帖子8 s1 m8 S  |9 ^9 }/ G

1 p/ S/ p& F1 `5 A你们用什么培养基和血清啊!我用的DMEM/F12,GIBCO血清
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发表于 2014-6-5 16:09 |只看该作者
回复 zhrt 的帖子" {! D; V  R6 W6 k9 T" ~, q& [
9 ~* g0 G  ?: g
我们用的是组织块贴壁法,现在用的培养基跟你一样,之前用的无血清的,但是间充质培养的纯度还是可以的啊,你培养到第几代发现细胞纯度低的?能达到多少?我们基本向后传个一两代细胞纯度就已经比较高了。
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