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小鼠 分离的骨髓细胞要去除红细胞吗? [复制链接]

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楼主
发表于 2014-6-12 11:10 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
分离小鼠的骨髓细胞用于尾静脉注射移植。分离的骨髓细胞要去除红细胞吗? 不懂
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沙发
发表于 2014-6-12 13:58 |只看该作者
需要,用红细胞裂解液去除,不然会影响细胞的活力!
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藤椅
发表于 2014-6-12 14:40 |只看该作者
回复 dudumao17 的帖子5 |1 D& p! e' C( ^1 z8 P+ D
" M! K- }) ^1 `) f+ e1 W
有木有详细的protocol (小鼠骨髓移植)参考学习一下的,谢谢。

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板凳
发表于 2014-6-12 15:20 |只看该作者
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用红细胞裂解液好一点,细胞会长的好点。红细胞裂解液可以购买现成的;也可以自己配置:NH4CL------1.8675gTris---------0.65g纯水--------250ml再用HCL调节PH到7.2就可以用了,过滤除菌。希望能够帮到你
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报纸
发表于 2014-6-12 16:13 |只看该作者
回复 hyde 的帖子7 j' t; ^4 T# o3 d

0 p8 z& k: g# E/ o* p你是要用骨髓细胞尾静脉移植,还是做小鼠活体的骨髓移植?尾静脉就是直接打进去,骨髓移植,比较需要手法,一般是往股骨里打。从膝盖链接的软骨处,转一个洞,然后打进去
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地板
发表于 2014-6-12 18:14 |只看该作者
回复 dudumao17 的帖子  I( o9 y$ J) B; k/ c! c/ f9 {
: K( u+ A/ s7 A! s
就是尾静脉注射……是不是裂红就可以不用淋巴细胞分离液?使用淋巴细胞分离液就可以不用裂红了
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发表于 2014-6-13 12:39 |只看该作者
裂解后,养几天最好,碎片少很多。若是立即回输,用羟乙基淀粉把红细胞滤去
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发表于 2014-6-13 15:32 |只看该作者
回复 CELL007 的帖子
0 X0 h) q( g  D- @
7 a3 R5 F8 R& B/ h* r我看有人说裂解容易让细胞状态不好?是不是裂解时间太久了?

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发表于 2014-6-13 15:33 |只看该作者
回复 suning5 的帖子7 j  l  E! q3 _

& }3 `$ Z$ b" N0 {# h) U- H可不可以不裂红直接用分离液分离,洗两遍直接移植的?

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发表于 2014-6-13 16:15 |只看该作者
回复 hyde 的帖子" z) c; `" x' K, c3 L, I/ d& F

, c0 F# e. _6 a$ V" B' H4 I# C不是的,如果红细胞多,就需要裂红,和用不用淋巴细胞分离液是两回事儿。淋巴细胞分离液可以分离出单个核细胞,可能由于操作,或者分离液的原因,红细胞会混在里面,所以需要进一步裂红。
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