流式分选后继续培养细胞

shaozi402

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' S7 x) V+ \1 n5 }! O8 z; N/ m% E
这个细胞很脆弱的，要严加呵护，分选后第一代长好，以后就没问题了

luyue6453

回复 dwfrost 的帖子, r5 |, g# S: O7 g3 g6 W. V. L
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转染后为什么不用筛选方法，难道你的质粒没有筛选基因吗？你可以查一下，如果用筛选，细胞就生长很好，没那么麻烦，

dwfrost

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! j- Q3 Z6 g9 R. _/ a+ ^- i: V% s2 |0 A
这个就是GFP筛选。用抗性基因筛的话选感觉浓度把握不好，还有就是瞬时表达怎么控制筛选时间？双向摸索中……

dwfrost

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# }' q3 T( S+ x6 }
2 ?% ?: J- c. L4 U6 K分选后也能看到荧光，就是养一天后细胞全死了，急死人

luyue6453

回复 dwfrost 的帖子* G$ D. }5 p. G0 @- }

8 a- q$ ]" @3 h2 S# r, R4 [你看看相关论文都用什么浓度，根据你的细胞查找，然后你多设几个实验组，浓度幅度50左右，时间也是一样的，一般间隔两个小时，你试试，这样筛完了细胞很容易活。