流式分选后继续培养细胞

shaozi402

回复 dwfrost 的帖子% }, }9 i9 W1 Z2 g( q, \
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这个细胞很脆弱的，要严加呵护，分选后第一代长好，以后就没问题了

luyue6453

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! u, A9 D0 U0 j* k3 Q8 |
9 `& F5 C2 l) g% i! p- i" Y/ _转染后为什么不用筛选方法，难道你的质粒没有筛选基因吗？你可以查一下，如果用筛选，细胞就生长很好，没那么麻烦，

dwfrost

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, C- u4 \1 t1 t. M" Z# w8 f6 V; B1 p6 j" q1 p  L
这个就是GFP筛选。用抗性基因筛的话选感觉浓度把握不好，还有就是瞬时表达怎么控制筛选时间？双向摸索中……

dwfrost

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8 ]+ J  X; F0 L% |4 X- O7 D$ R
5 ^! a* M+ [9 S/ F# B9 i* D3 y分选后也能看到荧光，就是养一天后细胞全死了，急死人

luyue6453

回复 dwfrost 的帖子! s+ W+ u' W& u
1 U/ |  D/ @6 K
你看看相关论文都用什么浓度，根据你的细胞查找，然后你多设几个实验组，浓度幅度50左右，时间也是一样的，一般间隔两个小时，你试试，这样筛完了细胞很容易活。