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造血干细胞与OP9-DL1共培养时,DL1基因来源? [复制链接]

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楼主
发表于 2014-7-1 14:34 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
如题,最近在做人造血干细胞向T细胞分化这方面的工作,借鉴别人的用其与OP9-DL1细胞共培养,但是实验室只有小鼠来源DLL1基因的OP9-DL1细胞系,无人源DLL1基因的OP9-DL1细胞系,不知能不能用前者替代后者啊,不甚感激。。。
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沙发
发表于 2014-7-10 08:43 |只看该作者
是要自己构建细胞系的。人源和鼠源是有区别的。8 \, h+ n9 `0 q$ a. r
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藤椅
发表于 2014-7-16 17:00 |只看该作者
回复 binglovekun 的帖子
. G) l1 n) A; B+ T3 ?' G
4 S1 ^/ T. |& g& P; D; n我要诱导人ESC,是否用人的DLL1序列会更好一些?

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板凳
发表于 2014-7-20 15:42 |只看该作者
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回复 binglovekun 的帖子' b( e8 P& h* i. T9 u5 F% B
2 T/ ~* [" @+ j2 w$ F
你是诱导人ESCs还是鼠ESCs啊,用的是人源DLL1还是鼠源DLL1啊?

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金话筒 优秀会员

报纸
发表于 2014-9-15 12:10 |只看该作者
人和鼠DLL1基因是有去区别的,而且表达后的蛋白差异更大,是不同的,可能完全没有功能在人体系中。还有你说的鼠是大鼠还是小鼠?不过我建议你可以试试因为有些鼠蛋白也是有作用的,
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地板
发表于 2014-9-15 15:51 |只看该作者
回复 yuanyecat 的帖子
( k; d8 A2 }: e5 I9 R: W: l4 G+ I3 \
2 [2 q( T1 g/ R6 y3 G) s非常感谢!还想请教一个问题,不知您是否做过OP9细胞与hES的共培养,我的问题时在长时间的共培养过程中,OP9细胞的充脂现象会越来越严重,不知您是否遇到过这种情况,是如何解决的呢?非常感谢。。。。
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金话筒 优秀会员

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发表于 2014-9-16 15:31 |只看该作者
这个是脂肪变性,我们实验室有同事也出现了这个情况,更换了血清好了。血清一定要质量过关,血清也差不多是细胞培养的关键,楼主更换血清吧。% l* `) m5 a" x" h# U" s; {, G' L& t
有时候,血清同一公司,不同批号的质量品质也不同,所以尽量购买同一批号的,尤其是你以前用过很不错的那个批号。现在国内市场上很多血清都是假的,你一定要试试好的,然后多好一批多买几瓶。建议你换血清,否则这个op9你没办法培养。
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发表于 2014-9-18 10:56 |只看该作者
回复 yuanyecat 的帖子
* x& j" d- i. {* i8 |" o- S2 ^) `2 q3 l
我用的是Gibco 10099-141的血清 应该算高质量的了,正常传代时不会有,抑制5天以内也不会有 但是过度抑制7天以后就特别多了,不知道你们的细胞过度抑制后是否有这样的情况
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