有经验的大侠帮我看看这两张图片，细胞是怎么回事，培养基没有变浑浊

康小纬

康小纬

在MEF上养的也是这样，底部有一层的黑东西，细胞会慢慢的凋亡，请各位帮我分析分析，我是新手，刚刚接触干细胞，请指教，谢谢了

伊诺强

你这样的什么细胞，在什么上养的，状态变化，天数..................................................

watchen198891

能够观察到黑点在动吗？如果干细胞在慢慢凋亡，那应该是污染了。有可能是黑胶虫或者细菌污染

康小纬

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是的，细胞会凋亡，如果是黑胶虫或者细菌污染应该怎么防制？培养基里我有加ps，我在mef上养 的也会有这种情况，我该怎么办，请指教，谢谢

淡定的摩羯

假设你的培养基没有问题的话  有可能是你的干细胞本身污染啦  

wangshan

是污染了，我也遇到过类似的情况。短时间内不怎么影响细胞的存活，但是稍微长时间细胞会慢慢死亡。最好测试一下分离和培养该细胞用到的所有试剂，检测是否是某种试剂被污染。方法：用一个24（or 12）孔板，将每种试剂（培养液、PBS等）分别加入24孔板孔中，放入37度培养箱培养，几天之后观察是否有某种试剂有类似的黑点。

watchen198891

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我觉得还是要注意操作就是了，最好还是不要用双抗，用了双抗会让我们忽略很多问题，还有你要确定你的干细胞是不是在冻存的时候已经就污染了，你最好做个对照吧，一个空皿加入培养基然后一个拿来样干细胞，如果空皿中的培养基继续长出这个黑点那就可能是培养基污染了，情况以此类推的分析。

cao8194595

培养液颜色有变化吗，如果是污染酸碱度会发生改变。# N+ `; s( o0 h% q& R
双抗有时候是不好用的，因为其在4度下几天就会失效，长期保存要放负20，加到培养液当中如果短期用不完也会失效。其次双抗只是抑制而起不到杀菌作用，但抑制时间不会很长，尤其是在37度情况下。

康小纬

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1 v" R" }$ x. ]; M1 h( S9 ]1 g* @( a我现在的情况是传代的话干细胞基本上就活不了，开始凋亡，感觉更严重了，止不住了