H1细胞传代时种密了怎么办

susan901017

如题，传代第一天后发现细胞太密了，细胞对我而言很珍贵，很怕会分化。mTesR里培养，无feeder，单细胞+Y传代，跪求高手解答

hyde

早点传代就可以了

hustdreamer

无feeder单细胞培养不会分化吗？

susan901017

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! u5 O; k+ w  x* e# d
我觉得挺容易分化的，但是友方单位一直这样养

yeungfan

等长满继续传就好了，一般分化的很少吧，如果分化的多的话，就要用吸引器吸走了。

hustdreamer

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. ~( b7 I; Q+ k/ U1 l8 g% V7 T
- _* V5 d7 k. ?: y" f2 h1 q: s能否具体说说友方单位是怎么培养的？培养的效果如何？是否容易分化？

生命之轻

“mTesR里培养，无feeder，单细胞+Y传代” 这里我们实验室也是mTesR里培养，无feeder，但是我们传代是Dispase消化，用玻璃移液管刮下，吹打三下（注意不能吹得太散！） 按1:6传代种到预先铺好matrigel的6孔板中。你用的单细胞+Y，我们只有做分化是才用这种方法，我这单细胞+Y应该是利于分化，正常传代不能这么做！

缥飘实验员

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+ T8 w; b: {4 o$ b* Q( _5 O  C
) q2 ~3 k" p" O培养体系一样，传代是Dispase消化，查了下，好贵，我们现在用 accutase 消化3分钟，就复苏时加 Y，传代就不用 Y，不知道传代加 Y与不加 Y 有什么作用，求问？9 t% @3 ^6 [, P* F& h/ {4 Z
我现在做的是复苏传代冻存细胞，养着养着老爱分化，第四天的样子就看着有些分化，在显微镜下标记刮除。求问怎么减少分化？0 H9 m5 w' m5 w  E& G

2 k; U) R7 J# ?

woshizh

回复 生命之轻 的帖子0 F/ z6 ^; u1 q  A/ W: i

- F* @* G" }, ^, ]" |! JDispase只能消化成团块、不能成单细胞吧，并且用移液管刮也是团块的操作方法

生命之轻

回复 woshizh 的帖子; @5 _& d9 m! q9 G4 v
. H' u. f+ ^4 h/ S
嗯是的。Dispase只能消化成团块、不能成单细胞，并且用移液管刮也是团块的操作方法。
1 X9 t$ u7 [+ w" m/ J1 B( t2 J4 S2 \更正一下，我们也有用acutase消化成单细胞+Y传代的。之前说法有误