关于western blot 条带大小 - 实验室综合讨论区干细胞之家



免疫细胞治疗专区	欢迎关注干细胞微信公众号

返回列表

查看: 160187\|回复: 9	go [讨论] 关于western blot 条带大小 [复制链接]

小白

新手上路

Rank: 1

积分: 31
威望: 31
包包: 271

楼主

发表于 2014-8-7 16:43 |只看该作者 |倒序浏览 |打印

关于western blot 。我做出的目的条带30kd左右，而抗体说明书上是60kd左右。做出的条带特别清楚，无杂带。（提取的细胞核蛋白）求解~. \' |! Y. k& K1 H

已有 1 人评分	威望	包包	收起理由
细胞海洋	+ 1	+ 5	欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 1 包包 + 5 查看全部评分

回复引用

Rank: 1

积分: 26
威望: 26
包包: 212

沙发

发表于 2014-8-8 09:35 |只看该作者

是不是抗体的问题呢？

已有 1 人评分	威望	包包	收起理由
细胞海洋	+ 1	+ 5	欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 1 包包 + 5 查看全部评分

回复引用

举报返回顶部

murong

注册会员

Rank: 2

积分: 85
威望: 85
包包: 1129

藤椅

发表于 2014-8-8 22:12 |只看该作者

抗体的问题大些吧，特异性不好，可以向卖抗体的问一下

已有 1 人评分	威望	包包	收起理由
细胞海洋	+ 2	+ 10	欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 2 包包 + 10 查看全部评分

回复引用

举报返回顶部

GreenWish

新手上路

Rank: 1

积分: 10
威望: 10
包包: 42

板凳

发表于 2014-8-9 14:00 |只看该作者

可能是抗体的问题。跟公司核实一下，看公司有没有对照的标准样品。

已有 1 人评分	威望	包包	收起理由
细胞海洋	+ 2	+ 10	欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 2 包包 + 10 查看全部评分

回复引用

举报返回顶部

embryonic12

中级会员

Rank: 3 Rank: 3

积分: 314
威望: 314
包包: 603

优秀会员

报纸

发表于 2014-8-9 18:16 |只看该作者

我有时也遇到这种情况，目的条带和理论不符，感觉很可能是抗体的问题，也有人说是目的蛋白降解，注意制备过程对蛋白样品的保护。

已有 1 人评分	威望	包包	收起理由
细胞海洋	+ 3	+ 10	欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 3 包包 + 10 查看全部评分

回复引用

举报返回顶部

xray19

注册会员

Rank: 2

积分: 106
威望: 106
包包: 15

地板

发表于 2014-8-11 15:54 |只看该作者

有几个问题还是需要先弄清楚才能回答。一个是你的目的蛋白的理论分子量应该是多大？是抗体说明书上标注的60kd吗？第二个是抗体说明书上所采用的wb样品与你所采用的样品是否一致？因为有的抗体生产商检测其抗体是否有效，采用的样品是纯化蛋白，根本反映不出其抗体的特异性。第三个，你是否延长过曝光时间，在胶片上尽量曝出杂带？有无60kd的条带？