新手培养胎盘干细胞，全死了，求高人解答

cantonchn

楼主杀生！~~~

鹏程万里

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4 a, u1 Q' p2 E7 J. {6 n' T5 g+ \* W4 p( D' F! D
我们师哥师姐说消化尽量短些，时间长了会破坏细胞生长，可能跟我们培养的细胞有关系吧。

hameln

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你可以消化的时候就放在显微镜下看 然后用手拍一下培养皿 好了就直接终止  不要一直等他自己慢慢消化好试试

鹏程万里

回复 hameln 的帖子% u3 H1 {5 q( {: y" F

, D1 Z5 E8 e% X8 _" A$ ~是的，在显微镜下边拍边观察，消化了半个小时都没消化下来，最后又是吹打才勉强弄下来一下，培养后全死了。

hdna287730127

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- c; g& B! \. a* L你的胰酶的浓度时多大的？ 有没有稀释的？还有消化之前有没有用生理盐水洗掉培养基？

鹏程万里

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消化前用PBS洗了，有血清胰酶会失效，胰酶浓度是0.25%

hdna287730127

胰酶可以稀释一倍再用。

tess1029

是不是剪得不够小才造成难以消化的 ，你消化那么久 ，细胞很容易死亡

屋檐上的乌鸦

我觉得是消化过度的问题。给楼主一个建议，以后在遇到这种较难消化的情况，在消化的过程中可以拍打培养瓶，力度自己掌握，还要不停的前后左右摇！这样消化的时间会相对缩短！