还是不能准确把握老化

倒腾细胞

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P1代大鼠MSC细胞。昨天的和今天的。感觉有点老化，但是今天还是做了传代P2.还望各位前辈指点~
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lovesxj941

按理说P1和P2不应该这个样子。可以考虑换一下血清，或者考虑是不是未加谷氨酰胺。另外，选用无血清培养基可能会好一些。

倒腾细胞

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血清是高糖DMEM+15%FBS，谷氨酰胺估计的确分解掉了~ 无血清的没搞过 Hold不住吧

lovesxj941

可以考虑换一下DF-12培养基试试。然后血清浓度10%就可以。谷氨酰胺加一些。掌握好换液时间。一般不要超过3天。血清什么牌子？

guanyufei

考虑一下10%血清看看，一般血清浓度高了，细胞也会粗糙的

倒腾细胞

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5 @% N$ j$ |1 S. q  R4 a! W血清是Gibco（北美的）  。那如果用DF-12培养基，血清浓度怎么弄呢前辈？没用过~

lovesxj941

回复 倒腾细胞 的帖子! J& V0 R: h( ]! D

# S) G  s& j9 L# z* d就10%的血清浓度就可以。范围的话5%-15%都可以养的起来。DF-12的营养不如DMEM，但是营养更为全面一些。可以参照一下Hyclone公布的培养基配方。

倒腾细胞

回复 lovesxj941 的帖子$ s* f$ @2 ?4 W

; v+ {3 Z: T5 D' ]. G我之前看好像超过一半的文献或者实验工作者都是用的低糖DMEM，我自己现在高低都有在做~