低糖DMEM+FBS10%培养SD大鼠MSC，P0和P1代消化不下来啊很吃力。

倒腾细胞

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( N0 ?( X5 u& e# I  z( I9 p- f5 _有用PBS洗瓶壁。7 z- P$ }1 X% V5 S& r
微量FBS可至胰酶失效？这个以前都不知道诶！多谢~) C8 h0 t7 ?! @" G$ h8 k% p

倒腾细胞

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  今天让一个博士师兄看了下细胞 细胞应该就是MSC没错  

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回复 zhen022 的帖子
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, L( Z, k6 [- L1 a" M前辈 你们胰酶消化、培养基终止消化后 转 离心管离心吗？! s7 k5 {, f0 r
那些不离心的是不是因为胰酶里不含EDTA或者稀释后EDTA含量很少呢？不知道离心对传代细胞影响有多大，我们一般都是1500转离心5分钟。

鹏程万里

回复 倒腾细胞 的帖子' s% u- N9 g) c2 P( `
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哦，MSC应该不难消化，这么难消化，就算消化下来也不会活得很好了。

爱飞的成成

我想说，你这个MSC很不纯

倒腾细胞

回复 爱飞的成成 的帖子  ~" ^0 r: a  l$ H# J) X

1 `9 h2 f) Y: ?+ J# f. d* T好吧 可能取材操作问题太大。。。

cyagen

这个杂细胞太多啦，正常时间（1-2min）都没有消化下来的细胞就是杂细胞了

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回复 cyagen 的帖子9 H5 k7 w  A; O  R0 t
4 l0 J5 R/ s% k1 ?
我看这低糖的基本废了 那请问前辈 我用PBS洗了的还这么咋 主要是原代取材问题吗？有什么补救措施呢前辈？

yongganyixie

加胰酶后放培养箱消化，1分钟左右到镜下看一眼，看细胞消化得怎么样

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回复 yongganyixie 的帖子0 k+ l) k- l- U& ~' Y6 t, u2 t1 t( Q

8 ^" h' ?& B, M2 q' ?- q+ f( o有这步操作 细胞还是下不来  今天消高糖的就很轻松 估计跟原代细胞状态还是有很大关系吧