低糖DMEM+FBS10%培养SD大鼠MSC，P0和P1代消化不下来啊很吃力。

倒腾细胞

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- P; T; U, z6 A/ N- ]+ s* X6 [6 N; B. N+ d5 J7 g: q: I
有用PBS洗瓶壁。1 ~4 W9 a* j! s" }' n# a
微量FBS可至胰酶失效？这个以前都不知道诶！多谢~
* k, x- {' A: M/ x4 g- ^

倒腾细胞

回复 鹏程万里 的帖子, S3 ^, i( e* S  d' z- Q- F) b4 g

8 q: J6 ~+ F0 i+ W% t  今天让一个博士师兄看了下细胞 细胞应该就是MSC没错  

倒腾细胞

回复 zhen022 的帖子1 m: w4 F6 g0 O* U6 B( {+ W; K! Y

6 Y5 P% p" `0 j/ g' k前辈 你们胰酶消化、培养基终止消化后 转 离心管离心吗？  A, g4 e- F* o7 j& L
那些不离心的是不是因为胰酶里不含EDTA或者稀释后EDTA含量很少呢？不知道离心对传代细胞影响有多大，我们一般都是1500转离心5分钟。

鹏程万里

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0 I5 S( [" m( y  M- ]5 s: Y( h; g2 G- A7 `( y% S$ |6 v
哦，MSC应该不难消化，这么难消化，就算消化下来也不会活得很好了。

爱飞的成成

我想说，你这个MSC很不纯

倒腾细胞

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# u6 V( d, k" D! W2 }
" Q$ t. z9 [  k/ a; y! M好吧 可能取材操作问题太大。。。

cyagen

这个杂细胞太多啦，正常时间（1-2min）都没有消化下来的细胞就是杂细胞了

倒腾细胞

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4 h! g; X3 O! P. [
5 ^* x" D5 ^- Y4 u& v. G我看这低糖的基本废了 那请问前辈 我用PBS洗了的还这么咋 主要是原代取材问题吗？有什么补救措施呢前辈？

yongganyixie

加胰酶后放培养箱消化，1分钟左右到镜下看一眼，看细胞消化得怎么样

倒腾细胞

回复 yongganyixie 的帖子4 L. m( H! x; d0 |: b/ \" R3 _. \$ x

1 v1 i# Z3 A6 X# d4 q" [) P有这步操作 细胞还是下不来  今天消高糖的就很轻松 估计跟原代细胞状态还是有很大关系吧