低糖DMEM+FBS10%培养SD大鼠MSC，P0和P1代消化不下来啊很吃力。

倒腾细胞

回复 末末 的帖子+ j5 g. w( {0 N  i* v' c- g2 P

! J2 s6 Y6 Q) G: K有用PBS洗瓶壁。' b6 h. \. {5 y% N9 K" |
微量FBS可至胰酶失效？这个以前都不知道诶！多谢~
0 e6 T. n+ `4 \

倒腾细胞

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$ r2 q, U& j( R
' G4 o% q9 \1 E8 }  今天让一个博士师兄看了下细胞 细胞应该就是MSC没错  

倒腾细胞

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2 z* x' P3 y/ V1 I# o2 m% f
$ }2 B% H- y! Y; d# ?前辈 你们胰酶消化、培养基终止消化后 转 离心管离心吗？3 o* v3 m7 D0 t
那些不离心的是不是因为胰酶里不含EDTA或者稀释后EDTA含量很少呢？不知道离心对传代细胞影响有多大，我们一般都是1500转离心5分钟。

鹏程万里

回复 倒腾细胞 的帖子1 n% Q5 n( |( [# d
: C% T0 e8 w" V: d. B0 ?; V
哦，MSC应该不难消化，这么难消化，就算消化下来也不会活得很好了。

爱飞的成成

我想说，你这个MSC很不纯

倒腾细胞

回复 爱飞的成成 的帖子
# S$ @# J6 l- N, ]& N4 [8 w3 l
# J9 p5 [  g2 a* B好吧 可能取材操作问题太大。。。

cyagen

这个杂细胞太多啦，正常时间（1-2min）都没有消化下来的细胞就是杂细胞了

倒腾细胞

回复 cyagen 的帖子$ _4 N7 @& u1 K8 f* N4 W3 t

" I6 N7 A$ j6 H4 [( O$ e; T( y我看这低糖的基本废了 那请问前辈 我用PBS洗了的还这么咋 主要是原代取材问题吗？有什么补救措施呢前辈？

yongganyixie

加胰酶后放培养箱消化，1分钟左右到镜下看一眼，看细胞消化得怎么样

倒腾细胞

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# t/ K& [+ g4 }6 `# a
' _) f* Y5 }# V有这步操作 细胞还是下不来  今天消高糖的就很轻松 估计跟原代细胞状态还是有很大关系吧